ઘર સંશોધન વાઈરોલોજિકલ રક્ત પરીક્ષણ. માઇક્રોબાયોલોજીમાં વાઇરોલોજીકલ સંશોધન પદ્ધતિઓ

સંશોધન

વાઈરોલોજિકલ રક્ત પરીક્ષણ. માઇક્રોબાયોલોજીમાં વાઇરોલોજીકલ સંશોધન પદ્ધતિઓ

વાયરલ રોગોનું ઇટીઓલોજિકલ નિદાન વાઇરોલોજિકલ, વાયરસોસ્કોપિક, સેરોલોજીકલ અને મોલેક્યુલર આનુવંશિક પદ્ધતિઓનો ઉપયોગ કરીને હાથ ધરવામાં આવે છે. છેલ્લી ત્રણ પદ્ધતિઓનો ઉપયોગ એક્સપ્રેસ ડાયગ્નોસ્ટિક પદ્ધતિઓ તરીકે થઈ શકે છે.

વાઈરોલોજીકલ ડાયગ્નોસ્ટિક પદ્ધતિ.

પદ્ધતિનો અંતિમ ધ્યેય પ્રજાતિઓ અથવા સેરોલોજીકલ વેરિઅન્ટમાં વાયરસને ઓળખવાનો છે.વાઈરોલોજિકલ પદ્ધતિમાં ઘણા તબક્કાઓ શામેલ છે:

1) સંશોધન માટે સામગ્રીની પસંદગી;

2) વાયરસ ધરાવતી સામગ્રીની પ્રક્રિયા;

3) સામગ્રી સાથે સંવેદનશીલ જીવંત પ્રણાલીનું દૂષણ;

4) જીવંત પ્રણાલીઓમાં વાયરસનો સંકેત;

5) અલગ વાયરસનું ટાઇટ્રેશન;

6) રોગપ્રતિકારક પ્રતિક્રિયાઓમાં વાયરસની ઓળખ.

1. સંશોધન માટે સામગ્રીની પસંદગી .

તે રોગના પ્રારંભિક તબક્કામાં હાથ ધરવામાં આવે છે, તે નિયમોને આધીન છે જે વિદેશી માઇક્રોફ્લોરા અને તબીબી કર્મચારીઓના ચેપ સાથે સામગ્રીના દૂષણને અટકાવે છે. પરિવહન દરમિયાન વાયરસના નિષ્ક્રિયતાને રોકવા માટે, સામગ્રીને વાયરલ ટ્રાન્સપોર્ટ માધ્યમ (VTS) માં મૂકવામાં આવે છે જેમાં સંતુલિત મીઠાનું દ્રાવણ, એન્ટિબાયોટિક્સ અને સીરમ આલ્બ્યુમિન હોય છે. સામગ્રીને થર્મલ ઇન્સ્યુલેશન અને બરફ ધરાવતી બંધ પ્લાસ્ટિકની થેલીઓ સાથે વિશિષ્ટ કન્ટેનરમાં પરિવહન કરવામાં આવે છે. જો જરૂરી હોય તો, સામગ્રી -20˚C પર સંગ્રહિત થાય છે. સંશોધન માટેની સામગ્રીના દરેક નમૂનાને દર્દીનું નામ, સામગ્રીનો પ્રકાર, સંગ્રહની તારીખ, વિગતવાર ક્લિનિકલ નિદાન અને અન્ય માહિતી દર્શાવતા ચિહ્નિત અને લેબલવાળા હોવા જોઈએ.

રોગની પ્રકૃતિના આધારે, સંશોધન માટેની સામગ્રી આ હોઈ શકે છે:

1) ફેરીંક્સના અનુનાસિક ભાગમાંથી સ્વેબ અને ગળામાંથી સ્વેબ;

2) સેરેબ્રોસ્પાઇનલ પ્રવાહી;

3) મળ અને રેક્ટલ સ્વેબ;

6) સીરસ પોલાણમાંથી પ્રવાહી;

7) કોન્જુક્ટીવામાંથી સમીયર;

8) વેસિકલ્સની સામગ્રી;

8) વિભાગીય સામગ્રી.

ઓરોફેરિન્ક્સમાંથી વોશ મેળવવા માટે, 15-20 મિલી વીટીએસનો ઉપયોગ થાય છે. દર્દી કાળજીપૂર્વક 1 મિનિટ માટે VTS ને ગાર્ગલ કરે છે અને જંતુરહિત બોટલમાં કોગળા કરે છે.

જંતુરહિત કપાસના સ્વેબ સાથે ગળાના પાછળના ભાગમાંથી સ્મીયર લેવામાં આવે છે, સ્પેટુલા સાથે જીભના મૂળ પર દબાવીને. ટેમ્પનને 2-3 મિલી વીટીએસમાં મૂકવામાં આવે છે, તેને ધોઈને સ્ક્વિઝ કરવામાં આવે છે.

સેરેબ્રોસ્પાઇનલ પ્રવાહી કરોડરજ્જુના નળ દ્વારા મેળવવામાં આવે છે. 1-2 મિલી સેરેબ્રોસ્પાઇનલ પ્રવાહીને જંતુરહિત કન્ટેનરમાં મૂકવામાં આવે છે અને પ્રયોગશાળામાં પહોંચાડવામાં આવે છે.

સ્ટૂલના નમૂનાઓ જંતુરહિત શીશીઓમાં 2-3 દિવસમાં એકત્રિત કરવામાં આવે છે. હેન્ક્સ સોલ્યુશનનો ઉપયોગ કરીને પરિણામી સામગ્રીમાંથી 10% સસ્પેન્શન તૈયાર કરવામાં આવે છે. સસ્પેન્શનને 3000 આરપીએમ પર સેન્ટ્રીફ્યુજ કરવામાં આવે છે, સુપરનેટન્ટ એકત્રિત કરવામાં આવે છે, તેમાં એન્ટિબાયોટિક્સ ઉમેરવામાં આવે છે અને જંતુરહિત કન્ટેનરમાં મૂકવામાં આવે છે.

5-10 મિલીલીટરના જથ્થામાં વેનિપંક્ચર દ્વારા મેળવેલા લોહીને હેપરિન ઉમેરીને ડિફિબ્રિનેટ કરવામાં આવે છે. આખું લોહી સ્થિર થતું નથી અને એન્ટિબાયોટિક્સ ઉમેરવામાં આવતા નથી. સીરમ મેળવવા માટે, લોહીના નમૂનાઓ થર્મોસ્ટેટમાં 60 મિનિટ માટે 37˚C પર રાખવામાં આવે છે.

સીરસ પોલાણમાંથી પ્રવાહી 1-2 મિલીલીટરની માત્રામાં પંચર દ્વારા મેળવવામાં આવે છે. પ્રવાહી તરત જ વપરાય છે અથવા સ્થિર સંગ્રહિત થાય છે.

નેત્રસ્તરમાંથી એક સ્મીયર જંતુરહિત સ્વેબ સાથે લેવામાં આવે છે અને તેને વીટીએસમાં મૂકવામાં આવે છે, ત્યારબાદ એકત્રિત સામગ્રીને સેન્ટ્રીફ્યુજ અને સ્થિર કરવામાં આવે છે.

વેસિકલ્સની સામગ્રીને પાતળી સોય સાથે સિરીંજ વડે એસ્પિરેટ કરવામાં આવે છે અને VTS માં મૂકવામાં આવે છે. સામગ્રીને કાચની સ્લાઇડ્સ પર અથવા સીલબંધ જંતુરહિત રુધિરકેશિકાઓ અથવા એમ્પ્યુલ્સમાં સૂકા સ્મીયર્સના સ્વરૂપમાં પ્રયોગશાળામાં મોકલવામાં આવે છે.

વિભાગીય સામગ્રી શક્ય તેટલી વહેલી તકે પસંદ કરવામાં આવે છે, એસેપ્ટિક નિયમોનું અવલોકન કરે છે. દરેક નમૂનાને એકત્રિત કરવા માટે જંતુરહિત સાધનોના અલગ સેટનો ઉપયોગ કરવામાં આવે છે. લેવામાં આવેલ પેશીઓની માત્રા 1-3 ગ્રામ છે, જે જંતુરહિત શીશીઓમાં મૂકવામાં આવે છે. પ્રથમ, એક્સ્ટ્રાકેવિટરી અંગો (મગજ, લસિકા ગાંઠો, વગેરે) માંથી નમૂના લેવામાં આવે છે. પેટની પોલાણ ખોલતા પહેલા છાતીના પોલાણમાંથી પેશી એકત્રિત કરવામાં આવે છે. પરિણામી પેશીના નમૂનાઓ જંતુરહિત રેતી અને જંતુરહિત સોડિયમ ક્લોરાઇડ સોલ્યુશનના ઉમેરા સાથે મોર્ટારમાં ગ્રાઉન્ડ કરવામાં આવે છે, ત્યારબાદ સામગ્રીને સેન્ટ્રીફ્યુજ કરવામાં આવે છે. સુપરનેટન્ટને શીશીઓમાં એકત્રિત કરવામાં આવે છે અને એન્ટિબાયોટિક્સ ઉમેરવામાં આવે છે. વાઈરોલોજિકલ સંશોધન માટેની સામગ્રીનો તાત્કાલિક ઉપયોગ થાય છે અથવા -20˚C તાપમાને સંગ્રહિત થાય છે.

2. વાયરસ ધરાવતી સામગ્રીની પ્રક્રિયા.

તે સામગ્રીને બેક્ટેરિયલ માઇક્રોફ્લોરા સાથે મુક્ત કરવાના ઉદ્દેશ્ય સાથે હાથ ધરવામાં આવે છે. આ હેતુ માટે, ભૌતિક અને રાસાયણિક પદ્ધતિઓનો ઉપયોગ કરવામાં આવે છે.

શારીરિક પદ્ધતિઓ:

1) વિવિધ બેક્ટેરિયલ ફિલ્ટર દ્વારા શુદ્ધિકરણ;

2) સેન્ટ્રીફ્યુગેશન.

રાસાયણિક પદ્ધતિઓ:

1) સુપરકેપ્સિડ ન હોય તેવા વાયરસના અલગતાના કિસ્સામાં ઈથર સાથે સામગ્રીની સારવાર;

2) સામગ્રીમાં હેપ્ટેન અને ફ્રીઓનનું મિશ્રણ ઉમેરવું;

3) એન્ટિબાયોટિક્સનો વહીવટ (પેનિસિલિન - 200-300 U/ml; સ્ટ્રેપ્ટોમાસીન - 200-500 mcg/ml; nystatin - 100-1000 U/ml).

3. સામગ્રી દ્વારા સંવેદનશીલ જીવંત પ્રણાલીનું દૂષણ.

1) પ્રયોગશાળા પ્રાણીઓ;

2) ચિકન એમ્બ્રોયો;

3) અંગ સંસ્કૃતિ;

4) ટીશ્યુ કલ્ચર.

પ્રયોગશાળા પ્રાણીઓ. સફેદ ઉંદર, ગિનિ પિગ, હેમ્સ્ટર, સસલા વગેરેનો ઉપયોગ થાય છે.સફેદ ઉંદર મોટી સંખ્યામાં પ્રકારના વાઈરસ પ્રત્યે સૌથી વધુ સંવેદનશીલ હોય છે. પ્રાણીઓને ચેપ લગાડવાની પદ્ધતિ પેશીઓમાં વાયરસના ઉષ્ણકટિબંધ દ્વારા નક્કી કરવામાં આવે છે. ન્યુરોટ્રોપિક વાયરસ (હડકવા વાયરસ, પોલિઓવાયરસ, વગેરે) ને અલગ કરતી વખતે મગજમાં ચેપનો ઉપયોગ થાય છે. જ્યારે શ્વસન ચેપના પેથોજેન્સને અલગ કરવામાં આવે છે ત્યારે ઇન્ટ્રાનાસલ ચેપ હાથ ધરવામાં આવે છે. ઇન્ટ્રામસ્ક્યુલર, ઇન્ટ્રાવેનસ, ઇન્ટ્રાપેરીટોનિયલ, સબક્યુટેનીયસ અને ચેપની અન્ય પદ્ધતિઓનો વ્યાપકપણે ઉપયોગ થાય છે. બીમાર પ્રાણીઓને ઈથર સાથે euthanized કરવામાં આવે છે, ખોલવામાં આવે છે અને અંગો અને પેશીઓમાંથી સામગ્રી એકત્રિત કરવામાં આવે છે.

ચિકન એમ્બ્રોયો. વ્યાપકપણે ઉપલબ્ધ અને ઉપયોગમાં સરળ. 5 થી 14 દિવસની ઉંમરના ચિકન એમ્બ્રોયોનો ઉપયોગ થાય છે. ચેપ પહેલાં, ચિકન એમ્બ્રોયો ઓવોસ્કોપિક હોય છે: તેમની કાર્યક્ષમતા નક્કી કરવામાં આવે છે, હવાની કોથળીની સરહદ અને ગર્ભનું સ્થાન શેલ (ગર્ભની "શ્યામ આંખ") પર ચિહ્નિત થયેલ છે. ચિકન એમ્બ્રોયો સાથે કામ જંતુરહિત સાધનો (ટ્વીઝર, સિરીંજ, કાતર, ભાલા, વગેરે) સાથે જંતુરહિત બૉક્સમાં હાથ ધરવામાં આવે છે. કામનો ટુકડો પૂર્ણ કર્યા પછી, ટૂલ્સ 70% ઇથિલ આલ્કોહોલમાં ડૂબી જાય છે અને આગામી મેનીપ્યુલેશન પહેલાં બાળી નાખવામાં આવે છે. ચેપ પહેલાં, ચિકન ગર્ભના શેલને બર્નિંગ આલ્કોહોલ સ્વેબ અને આયોડિનના આલ્કોહોલ સોલ્યુશનથી સાફ કરવામાં આવે છે. ગર્ભમાં ઇન્જેક્ટ કરાયેલ પરીક્ષણ સામગ્રીનું પ્રમાણ 0.1-0.2 મિલી છે. એક સામગ્રીમાંથી વાયરસને અલગ કરવા માટે, ઓછામાં ઓછા 4 ચિકન એમ્બ્રોયોનો ઉપયોગ થાય છે.

વાઈરોલોજીકલ પદ્ધતિબે મુખ્ય તબક્કાઓનો સમાવેશ થાય છે: વાયરસનું અલગતા અને તેમની ઓળખ. સામગ્રી લોહી, અન્ય જૈવિક અને રોગવિજ્ઞાનવિષયક પ્રવાહી, અંગો અને પેશીઓની બાયોપ્સી હોઈ શકે છે.

અર્બોવાયરલ ચેપનું નિદાન કરવા માટે વારંવાર વાયરલ રક્ત પરીક્ષણો કરવામાં આવે છે. હડકવા, ગાલપચોળિયાં અને હર્પીસ સિમ્પ્લેક્સ વાયરસ લાળમાં શોધી શકાય છે. ઈન્ફલ્યુએન્ઝા અને અન્ય તીવ્ર શ્વસન વાયરલ ચેપ અને ઓરીના પેથોજેન્સને અલગ કરવા માટે નેસોફેરિંજલ સ્વેબનો ઉપયોગ થાય છે. એડેનોવાયરસ કોન્જુક્ટીવલ સ્વેબમાં જોવા મળે છે. વિવિધ એન્ટેરો-, એડેનો-, રિઓ- અને રોટાવાયરસ મળમાંથી અલગ કરવામાં આવે છે.

વાયરસને અલગ કરવા માટે, સેલ સંસ્કૃતિઓ, ચિકન એમ્બ્રોયો અને કેટલીકવાર પ્રયોગશાળા પ્રાણીઓનો ઉપયોગ થાય છે. મોટાભાગના પેથોજેનિક વાયરસ પેશીની હાજરી અને પ્રકાર વિશિષ્ટતા દ્વારા અલગ પડે છે. એકસાથે 3-4 કોષ સંસ્કૃતિઓને સંક્રમિત કરે છે, એમ ધારીને કે તેમાંથી એક સંવેદનશીલ હોઈ શકે છે. ચેપગ્રસ્ત સંસ્કૃતિઓમાં વાયરસની હાજરી ચોક્કસ કોષ અધોગતિના વિકાસ દ્વારા નક્કી કરવામાં આવે છે, એટલે કે સાયટોપેથોજેનિક ક્રિયા, અંતઃકોશિક સમાવેશની શોધ, તેમજ ઇમ્યુનોફ્લોરોસેન્સ, હકારાત્મક હેમાડસોર્પ્શન અને હેમાગ્ગ્લુટિનેશન પ્રતિક્રિયાઓ દ્વારા ચોક્કસ એન્ટિજેનની શોધ પર આધારિત. પક્ષીઓના ભ્રૂણ તેમની નબળી ભિન્ન પેશીઓ સાથે ઘણા વાયરસની ખેતી માટે યોગ્ય છે. મોટેભાગે, ચિકન એમ્બ્રોયોનો ઉપયોગ કરવામાં આવે છે. જ્યારે ગર્ભમાં ગુણાકાર કરવામાં આવે છે, ત્યારે વાયરસ તેમના મૃત્યુનું કારણ બની શકે છે. (આર્બોવાયરસ), કોરિઓન-એલેન્ટોઇક મેમ્બ્રેન (સ્મોલપોક્સ વાયરસ) અથવા ગર્ભના શરીરમાં ફેરફારોનો દેખાવ, ગર્ભના પ્રવાહીમાં હિમેગ્ગ્લુટીનિનનું સંચય (ઈન્ફલ્યુએન્ઝા વાયરસ, ગાલપચોળિયાં) અને વાયરલ એન્ટિજેનને પૂરક-ફિક્સિંગ.

ઇમ્યુનોલોજિકલ પદ્ધતિઓનો ઉપયોગ કરીને વાયરસની ઓળખ કરવામાં આવે છે: હેમેગ્ગ્લુટિનેશન અવરોધક પ્રતિક્રિયા, પૂરક ફિક્સેશન, તટસ્થતા, જેલ વરસાદ, ઇમ્યુનોફ્લોરેસેન્સ.

3.4 જૈવિક પદ્ધતિ

જૈવિક પદ્ધતિપેથોજેન સૂચવવા માટે વિવિધ સામગ્રી (ક્લિનિકલ, લેબોરેટરી) વડે પ્રયોગશાળાના પ્રાણીઓને ચેપ લગાડવાનો સમાવેશ થાય છે, તેમજ સુક્ષ્મસજીવોના કેટલાક ગુણધર્મો નક્કી કરવા માટે કે જે તેમની રોગકારકતા (ટોક્સિજેનિસિટી, ઝેરી, વાઇરુલન્સ) ની લાક્ષણિકતા ધરાવે છે. સફેદ ઉંદર, સફેદ ઉંદર, ગિનિ પિગ, સસલા વગેરેનો પ્રયોગશાળાના પ્રાણીઓ તરીકે ઉપયોગ થાય છે.

પ્રાણીમાં રોગનું પ્રજનન એ અલગ સુક્ષ્મસજીવોની રોગકારકતાનો સંપૂર્ણ પુરાવો છે (હડકવા, ટિટાનસ, વગેરેના કિસ્સામાં). તેથી, પ્રાણીઓ પર જૈવિક પરીક્ષણ એ એક મૂલ્યવાન અને વિશ્વસનીય નિદાન પદ્ધતિ છે, ખાસ કરીને એવા ચેપ માટે કે જેમના પેથોજેન્સ માનવ શરીરના અભ્યાસ કરેલા જૈવિક માધ્યમોમાં ઓછી સાંદ્રતામાં સમાયેલ છે અને કૃત્રિમ માધ્યમો પર નબળી અથવા ધીમે ધીમે વૃદ્ધિ પામે છે.

3.5 રોગપ્રતિકારક પદ્ધતિ

રોગપ્રતિકારક પદ્ધતિ(સેરોલોજિકલ) ચોક્કસ એન્ટિબોડીઝ અને એન્ટિજેન્સને ઓળખવા માટે રક્ત સીરમ, તેમજ અન્ય જૈવિક સબસ્ટ્રેટના અભ્યાસનો સમાવેશ કરે છે. ક્લાસિકલ સેરોડાયગ્નોસિસ ઓળખાયેલ અથવા શંકાસ્પદ પેથોજેન માટે એન્ટિબોડીઝના નિર્ધારણ પર આધારિત છે. સકારાત્મક પ્રતિક્રિયા પરિણામ રક્ત સીરમમાં પેથોજેન એન્ટિજેન્સ માટે એન્ટિબોડીઝની હાજરી સૂચવે છે; નકારાત્મક પરિણામ આવાની ગેરહાજરી સૂચવે છે. લોહીના સીરમમાં સંખ્યાબંધ ચેપી રોગોના કારક એજન્ટ માટે એન્ટિબોડીઝની શોધ એ નિદાન કરવા માટે પૂરતું નથી, કારણ કે તે ચેપી અથવા રસીકરણ પછીની પ્રતિરક્ષાની હાજરીને પ્રતિબિંબિત કરી શકે છે, તેથી, "જોડી" રક્ત સેરાની તપાસ કરવામાં આવે છે, પ્રથમ, રોગના પ્રથમ દિવસોમાં લેવામાં આવે છે, અને બીજી, 7-10 દિવસના અંતરાલ સાથે લેવામાં આવે છે. આ કિસ્સામાં, એન્ટિબોડી સ્તરોમાં વધારોની ગતિશીલતાનું મૂલ્યાંકન કરવામાં આવે છે.

ટેસ્ટ બ્લડ સીરમમાં એન્ટિબોડી ટાઇટરમાં પ્રારંભિક સ્તરની તુલનામાં ઓછામાં ઓછો 4 ગણો વધારો નિદાનની રીતે નોંધપાત્ર છે. આ ઘટનાને સેરોકન્વર્ઝન કહેવામાં આવે છે. દુર્લભ ચેપી રોગોમાં, તેમજ વાયરલ હેપેટાઇટિસ, એચઆઇવી ચેપ અને અન્ય કેટલાકમાં, એન્ટિબોડીઝની હાજરી સૂચવે છે કે દર્દી ચેપગ્રસ્ત છે અને તેનું નિદાન મૂલ્ય છે.

એન્ટિબોડી ટાઇટર નક્કી કરવા ઉપરાંત, સેરોલોજીકલ અભ્યાસ દરમિયાન એન્ટિબોડી આઇસોટાઇપ નક્કી કરવાનું શક્ય છે. તે જાણીતું છે કે રોગના તીવ્ર સમયગાળામાં પેથોજેન સાથે માનવ શરીરની પ્રથમ બેઠકમાં, આઇજીએમ સાથે જોડાયેલા એન્ટિબોડીઝમાં વધુ ઝડપી વધારો જોવા મળે છે, જેનું સ્તર, મહત્તમ મૂલ્ય સુધી પહોંચે છે, પછી ઘટે છે. રોગના પછીના તબક્કામાં, IgG એન્ટિબોડીઝની સંખ્યામાં વધારો થાય છે, જે લાંબા સમય સુધી ચાલુ રહે છે અને પુનઃસ્વસ્થતાના સમયગાળા દરમિયાન નક્કી કરવામાં આવે છે. જ્યારે ફરીથી પેથોજેનનો સામનો કરવો પડે છે, ત્યારે ઇમ્યુનોલોજિકલ મેમરીને આભારી, હ્યુમરલ ઇમ્યુનિટી પ્રતિક્રિયાઓ IgG એન્ટિબોડીઝના ઝડપી ઉત્પાદન દ્વારા પ્રગટ થાય છે, અને વર્ગ M એન્ટિબોડીઝ ઓછી માત્રામાં ઉત્પન્ન થાય છે. IgM એન્ટિબોડીઝની શોધ વર્તમાન ચેપી પ્રક્રિયાની હાજરી સૂચવે છે, અને IgG એન્ટિબોડીઝની હાજરી ભૂતકાળના ચેપ અથવા રસીકરણ પછીની પ્રતિરક્ષા સૂચવે છે.

પ્રાથમિક અને ગૌણ રોગપ્રતિકારક પ્રતિભાવની લાક્ષણિકતાઓને ધ્યાનમાં લેતા, IgM અને IgG એન્ટિબોડીઝના ગુણોત્તરનું વિશ્લેષણ કેટલાક કિસ્સાઓમાં ચેપી પ્રક્રિયાના તબક્કા (રોગની ઊંચાઈ, સ્વસ્થતા, ફરીથી થવું) ને અલગ પાડવાની મંજૂરી આપે છે. ઉદાહરણ તરીકે, વાયરલ હેપેટાઇટિસ A (HA) ના કિસ્સામાં, એક વિશ્વસનીય નિદાન પદ્ધતિ એ રક્ત સીરમમાં એન્ટિ-એચએવી આઇજીએમ એન્ટિબોડીઝનું નિર્ધારણ છે. તેમની શોધ વર્તમાન અથવા તાજેતરના HAV ચેપ સૂચવે છે.

ચેપી રોગોમાં એન્ટિબોડીઝ શોધવા માટે સેરોલોજીકલ પરીક્ષણ એ પેથોજેનને અલગ પાડવા કરતાં પ્રયોગશાળા નિદાનની વધુ સુલભ પદ્ધતિ છે. કેટલીકવાર સકારાત્મક સેરોલોજીકલ પ્રતિક્રિયા એ અનુરૂપ ચેપી રોગના કારક એજન્ટ સાથે જીવતંત્રની એન્કાઉન્ટર અને ક્રિયાપ્રતિક્રિયાના એકમાત્ર પુરાવા તરીકે સેવા આપે છે. વધુમાં, સમાન ક્લિનિકલ ચિત્ર સાથેના સંખ્યાબંધ રોગો (ઉદાહરણ તરીકે, રિકેટ્સિયોસિસ, એન્ટરવાયરસ ચેપ) માત્ર સેરોલોજિકલ રીતે અલગ કરી શકાય છે, જે ચેપી રોગોના નિદાનમાં સેરોલોજીકલ પદ્ધતિઓના મહત્વને પ્રતિબિંબિત કરે છે.

કોર્સ વર્ક

"ક્લિનિકલ વાયરોલોજીની પદ્ધતિઓ"

પરિચય

વાયરલ ચેપનું લેબોરેટરી નિદાન મુખ્યત્વે ઇલેક્ટ્રોન માઈક્રોસ્કોપી, સંવેદનશીલ કોષ સંસ્કૃતિઓ અને રોગપ્રતિકારક પદ્ધતિઓનો ઉપયોગ કરીને હાથ ધરવામાં આવે છે. એક નિયમ તરીકે, વાયરલ ચેપના તબક્કાના આધારે નિદાન કરવા માટે એક પદ્ધતિ પસંદ કરવામાં આવે છે. ઉદાહરણ તરીકે, ત્રણેય અભિગમો વેરીસેલાના નિદાનમાં ઉપયોગી હોઈ શકે છે, પરંતુ માઇક્રોસ્કોપી અને કોષ સંવર્ધન તકનીકોનો સફળ ઉપયોગ રોગની શરૂઆતમાં સંતોષકારક નમૂનાઓ એકત્રિત કરવાની ક્ષમતા પર આધાર રાખે છે.

મોટા પ્રમાણમાં, વાયરલ ડાયગ્નોસ્ટિક્સની સફળતા મેળવેલ નમૂનાઓની ગુણવત્તા પર આધારિત છે. આ કારણોસર, લેબોરેટરી સ્ટાફ પોતે જ જરૂરી નમૂનાઓ એકત્ર કરવામાં સીધો સામેલ હોવો જોઈએ. નમૂનાઓની લાક્ષણિકતાઓ, તેમજ પ્રયોગશાળામાં તેમના વિતરણ માટેની પદ્ધતિઓ, લેનેટ, શ્મિટ, ક્રિસ્ટ, એટ અલ દ્વારા વર્ણવવામાં આવી છે.

પ્રયોગશાળા ડાયગ્નોસ્ટિક્સમાં ઉપયોગમાં લેવાતા મોટાભાગના રીએજન્ટ્સ અને સાધનો વિવિધ કંપનીઓ પાસેથી ખરીદી શકાય છે. મોટા ભાગના કિસ્સાઓમાં, સમાન રીએજન્ટ એકસાથે ઘણી કંપનીઓ દ્વારા બનાવવામાં આવે છે. આ કારણોસર, અમે વ્યક્તિગત કંપનીઓ સૂચવી નથી, સિવાય કે રીએજન્ટ માત્ર એક કંપની દ્વારા સપ્લાય કરવામાં આવે. અન્ય તમામ કિસ્સાઓમાં, તમારે કોષ્ટકમાં દર્શાવેલ સપ્લાયર્સની સામાન્ય સૂચિનો સંદર્ભ લેવો જોઈએ. 1.

માનવ વાયરલ ચેપનું નિદાન કરવા માટે હાલમાં ઉપલબ્ધ તમામ પદ્ધતિઓનું વ્યાપક વર્ણન આપવાનો અમારો ઉદ્દેશ્ય ન હતો. સૌ પ્રથમ, અમે મુખ્ય પદ્ધતિઓનું વર્ણન કર્યું. જેમ જેમ તમે સ્વતંત્ર રીતે કામ કરવાનો અનુભવ મેળવો છો તેમ, આ મૂળભૂત તકનીકોનો ઉપયોગ વધુ જટિલ સમસ્યાઓ ઉકેલવા માટે થઈ શકે છે.

1. ઇલેક્ટ્રોન માઇક્રોસ્કોપી

વાયરલ ચેપના ઇલેક્ટ્રોન માઇક્રોસ્કોપિક નિદાન માટે, અસરગ્રસ્ત પેશીઓના પાતળા વિભાગોનો ઉપયોગ કરી શકાય છે. ઇલેક્ટ્રોન માઇક્રોસ્કોપી માટે ઉપયોગમાં લેવાતી સૌથી સામાન્ય સામગ્રી મળ અથવા પ્રવાહી છે.

કોષ્ટક 1. રીએજન્ટ્સ અને સાધનો સપ્લાય કરતી કંપનીઓની સૂચિ

ફ્લો લેબોરેટરીઝ: ગિબ્કો યુરોપ: ટિશ્યુ કલ્ચર સર્વિસિસ: વેલકમ ડાયગ્નોસ્ટિક્સ: નોર્થમ્બ્રીયા બાયોલોજીકલ: ઓક્સોઈડ: ડાયનેટેક લેબોરેટરીઝ લિ.: સ્ટરિલિન લિ.: એબોટ લેબોરેટરીઝ લિ.:

વુડકોક હિલ, હેરફિલ્ડ રોડ, રિકમેન્સવર્થ, હર્ટફોર્ડશાયર WD3 1PQ, UK Unit 4, Cowley Mill Trading Estate, Longbridge Way, Uxbridge, Middlesex UB8 2YG, UK 10 Henry Road, Slough, Berkshire SL1 2QL, UK ટેમ્પલ 5, યુકે ટેમ્પલ, ડેરટફોર્ડ. યુકે સાઉથ નેલ્સન ઈન્ડસ્ટ્રીયલ એસ્ટેટ, ક્રેમલિંગ્ટન, નોર્થમ્બરલેન્ડ NE23 9HL, યુકે વેડ રોડ, બેસિંગસ્ટોક, હેમ્પશાયર RG24 OPW, UK Daux Road, Ballingshurst, Sussex RH14 9SJ, UK 43/45 બ્રોડ સ્ટ્રીટ, Teddington, Teddington, UK145 Broad Street, Teddington Hill, UK18, મિડલ. બેસિંગસ્ટોક, હેમ્પશાયર RG22 4EH, UK

વેસિકલ્સ કે જે અમુક રોગોની લાક્ષણિકતા ધરાવે છે, જેમ કે ચિકનપોક્સ. આવી સામગ્રીનું પૃથ્થકરણ કરતી વખતે, નકારાત્મક સ્ટેનિંગનો ઉપયોગ કરીને વાયરસ શોધી શકાય છે, જેના પરિણામે ઇલેક્ટ્રોન-ગાઢ સામગ્રી વિરીયનના ઘટકોને રેખાંકિત કરે છે. જ્યારે ટેસ્ટ સેમ્પલમાં વાયરસની સાંદ્રતા વધારે હોય ત્યારે પદ્ધતિ અસરકારક હોય છે, જેમ કે મળ અથવા વેસીક્યુલર પ્રવાહીમાં. એવા કિસ્સાઓમાં કે જ્યાં નમૂનાઓમાં વાયરલ કણોની સામગ્રી ઓછી હોય છે, વાયરસને શોધવાની સંભાવના અલ્ટ્રાસેન્ટ્રીફ્યુગેશન દ્વારા વાયરસને કેન્દ્રિત કરીને અથવા તેને ચોક્કસ એન્ટિબોડીઝ સાથે એકત્રિત કરીને વધારી શકાય છે. પછીની પદ્ધતિ વાયરસને ઓળખવા માટે પણ અનુકૂળ છે. અહીં આપણે રોટાવાયરસ ચેપના નિદાન માટે ઇલેક્ટ્રોન માઇક્રોસ્કોપિક પદ્ધતિ અને પારવોવાયરસ માટે ચોક્કસ એન્ટિબોડીઝ શોધવાના ઉદાહરણનો ઉપયોગ કરીને ઇમ્યુનોઇલેક્ટ્રૉન માઇક્રોસ્કોપી પદ્ધતિનું વર્ણન કરીશું. ઇલેક્ટ્રોન માઇક્રોસ્કોપી પદ્ધતિઓનું ક્ષેત્ર દ્વારા વધુ વિગતવાર વર્ણન કરવામાં આવ્યું છે.

2.1 મળની સીધી ઇલેક્ટ્રોન માઇક્રોસ્કોપિક પરીક્ષા

1. પાશ્ચર પીપેટની ટોચને મળમાં ડૂબાડો અને 1 સેમી સ્મીયર મેળવવા માટે પૂરતી સામગ્રી દોરો.

2. અર્ધપારદર્શક સસ્પેન્શન પ્રાપ્ત ન થાય ત્યાં સુધી ઇલેક્ટ્રોન માઇક્રોસ્કોપિક નેગેટિવ કોન્ટ્રાસ્ટ ડાયમાં ફેકલ સ્મીયરને ફરીથી ચાલુ કરો. નેગેટિવ કોન્ટ્રાસ્ટ ડાઇ એ નિસ્યંદિત પાણીમાં ફોસ્ફોટંગસ્ટિક એસિડનું 2% દ્રાવણ છે.

3. ઇલેક્ટ્રોન માઇક્રોસ્કોપિક નમૂનો મેળવવા માટે, સસ્પેન્શનનો એક ડ્રોપ કાર્બન-ફોર્મવર ફિલ્મ સાથે કોટેડ ઇલેક્ટ્રોન માઇક્રોસ્કોપી ગ્રીડ પર મૂકવામાં આવે છે. આ ઓપરેશન દરમિયાન, જાળીને પાતળા ટ્વીઝરની જોડી સાથે રાખવામાં આવે છે.

4. દવાને 30 સેકન્ડ માટે હવામાં છોડી દેવામાં આવે છે.

5. ફિલ્ટર પેપર સાથે કાચની ધારને સ્પર્શ કરીને વધારાનું પ્રવાહી દૂર કરવામાં આવે છે.

6. દવા હવામાં સૂકવવામાં આવે છે.

7. જો જરૂરી હોય તો, 440,000 μW-s/cm2 ની તીવ્રતા સાથે અલ્ટ્રાવાયોલેટ પ્રકાશ સાથે ગ્રીડની બંને બાજુઓને ઇરેડિયેટ કરીને સક્ષમ વાયરસને નિષ્ક્રિય કરવામાં આવે છે. આ કિસ્સામાં, ફિલ્ટર સાથે ટૂંકા-તરંગ અલ્ટ્રાવાયોલેટ લેમ્પનો ઉપયોગ થાય છે. દીવો ગ્રીડથી 15 સે.મી.ના અંતરે હોવો જોઈએ; દરેક બાજુ માટે ઇરેડિયેશન સમય 5 મિનિટ છે.

8. રોટાવાયરસ વિરિયન્સને ટ્રાન્સમિશન ઇલેક્ટ્રોન માઇક્રોસ્કોપ હેઠળ 30,000 થી 50,000 ના વિસ્તરણ સાથે દર્શાવી શકાય છે.

2.2 ઇમ્યુનોઇલેક્ટ્રોન માઇક્રોસ્કોપી

નીચે વર્ણવેલ ઇમ્યુનોઈલેક્ટ્રોન માઇક્રોસ્કોપી પદ્ધતિ ઘણી સમાન રોગપ્રતિકારક પદ્ધતિઓમાંથી એક છે. વાયરસ-વિશિષ્ટ એન્ટિબોડીઝનો અભ્યાસ કરવા માટે, વધુમાં, એક પદ્ધતિનો ઉપયોગ કરવામાં આવે છે જેમાં પ્રોટીન A ના માઇક્રોસ્કોપિક નેટવર્ક સાથે જોડાય છે. એન્ટિવાયરલ એન્ટિબોડીઝની કાર્યકારી સાંદ્રતા 1/10 થી 1/1000 ની રેન્જમાં અજમાયશ અને ભૂલ દ્વારા નક્કી કરવામાં આવે છે. અમે જે એકાગ્રતા સૂચવીએ છીએ તેનો ઉપયોગ સામાન્ય રીતે નિયમિત કાર્યમાં થાય છે. વાયરસ સાથે એન્ટિબોડીઝની ક્રિયાપ્રતિક્રિયા માટે શ્રેષ્ઠ પરિણામો મેળવવા માટે, પરવોવાયરસ ધરાવતા સીરમને એ જ રીતે ટાઇટ્રેટ કરવામાં આવે છે.

1. માનવ પર્વોવાયરસ માટે એન્ટિસેરમના 10 µlને PBS સાથે 100 વખત ભેળવવામાં આવે છે. સોલ્યુશનને પાણીના સ્નાનમાં 56 ° સે સુધી ગરમ કરવામાં આવે છે.

2. પીબીએસમાં સામાન્ય રીતે 2% એગ્રોઝના 10 મિલી ઓગળે અને પાણીના સ્નાનમાં 56 ° સે સુધી ઠંડુ કરો.

3. 56 °C પર, 1 મિલી પાતળું એન્ટિસેરમ 1 મિલી 2% એગરોઝ સાથે મિક્સ કરો.

4. પરિણામી મિશ્રણના 200 μl 96-વેલ માઇક્રોટાઇટર પ્લેટના બે કૂવામાં સ્થાનાંતરિત કરો.

5. એગરોઝને ઓરડાના તાપમાને સેટ કરવાની છૂટ છે. જો ટેબ્લેટને એડહેસિવ ટેપથી સીલ કરવામાં આવે તો તેને કેટલાક અઠવાડિયા માટે 4°C પર સંગ્રહિત કરી શકાય છે.

6. એગેરોઝ અને એન્ટિસેરમનું મિશ્રણ ધરાવતા કૂવામાં પરવોવાયરસ ધરાવતું 10 µl સીરમ ઉમેરો.

7. પૂર્વ-તૈયાર કાર્બન-ફોર્મવર કોટિંગ સાથે ઇલેક્ટ્રોન માઇક્રોસ્કોપી ગ્રીડ સીરમના ટીપા પર ઓછી ચળકતી બાજુ પર મૂકવામાં આવે છે.

8. મેશને ભેજવાળી ચેમ્બરમાં 37 °C તાપમાને 2 કલાક માટે રાખવામાં આવે છે.

9. પાતળા ટ્વિઝર્સનો ઉપયોગ કરીને, જાળી કા and ો અને સીરમના સંપર્કમાં રહેલી જાળીની સપાટી પર 2% ફોસ્ફોટંગસ્ટિક એસિડનો ડ્રોપ લાગુ કરો.

10. 30 સેકંડ પછી, વધારાનું પેઇન્ટ ધોવાઇ જાય છે, તૈયારી સુકાઈ જાય છે અને વાયરસ નિષ્ક્રિય થાય છે.

30,000 થી 50,000 ના વિસ્તરણ પર ટ્રાન્સમિશન ઇલેક્ટ્રોન માઇક્રોસ્કોપ હેઠળ એકીકૃત વાયરલ કણોની તપાસ કરવામાં આવે છે.

3. વાયરલ એન્ટિજેન્સની ઓળખ

પેશીઓ અથવા પેશી પ્રવાહીમાં જોવા મળતા વાયરસને એન્ટિજેન-એન્ટિબોડી પ્રતિક્રિયાનો ઉપયોગ કરીને વાયરસ-વિશિષ્ટ પ્રોટીન દ્વારા ઓળખી શકાય છે. એન્ટિજેન-એન્ટિબોડી પ્રતિક્રિયાના ઉત્પાદનને એક ટેગ સામે પરીક્ષણ કરવામાં આવે છે જે કાં તો સીધા એન્ટિવાયરલ એન્ટિબોડીઝમાં અથવા વાયરસ-વિશિષ્ટ એન્ટિબોડીઝ સામે નિર્દેશિત એન્ટિબોડીઝમાં દાખલ કરવામાં આવે છે. એન્ટિબોડીઝને ફ્લોરોસીન, કિરણોત્સર્ગી આયોડિન અથવા એન્ઝાઇમથી લેબલ કરી શકાય છે જે સબસ્ટ્રેટને કાપી નાખે છે જેના કારણે રંગ બદલાય છે. વધુમાં, હેમાગ્ગ્લુટિનેશન પ્રતિક્રિયાનો ઉપયોગ વાયરસને ઓળખવા માટે થાય છે. રોજિંદા વ્યવહારમાં, વર્ણવેલ પદ્ધતિઓનો ઉપયોગ મુખ્યત્વે લોહીમાં હેપેટાઇટિસ બી વાયરસના એન્ટિજેન્સને શોધવા અને વિવિધ વાયરસના એન્ટિજેન્સને શોધવા માટે થાય છે જે વિવિધ શ્વસન રોગોનું કારણ બને છે.

હાલમાં, ઘણી કંપનીઓ એરિથ્રોસાઇટ, કિરણોત્સર્ગી અને એન્ઝાઇમેટિક ડાયગ્નોસ્ટિક્સનું ઉત્પાદન કરે છે, જેમાં હેપેટાઇટિસ બી વાયરસને શોધવા માટેનો સમાવેશ થાય છે. અમે આ ડાયગ્નોસ્ટિક્સ સાથે કામ કરવા માટેની પદ્ધતિઓની રૂપરેખા આપવાનું સલાહભર્યું માનતા નથી: જોડાયેલ સૂચનાઓને અનુસરવા માટે તે પૂરતું છે. નીચે આપણે નાસોફેરિંજલ સ્ત્રાવમાં શ્વસન સિંસિટીયલ વાયરસને ઓળખવા માટે ઇમ્યુનોફ્લોરેસેન્સ પદ્ધતિ પર ધ્યાન કેન્દ્રિત કરીશું.

3.1 ઇમ્યુનોફ્લોરેસેન્સ દ્વારા નાસોફેરિંજલ સ્ત્રાવમાં શ્વસન સિંસિટીયલ વાયરસની ઓળખ

નાસોફેરિંજલ સ્ત્રાવની તૈયારીઓ મેળવવા માટેની પદ્ધતિ ગાર્ડનર અને મેકક્વિલિન દ્વારા વર્ણવવામાં આવી છે. પ્રયોગશાળાની પરિસ્થિતિઓમાં, આ કામગીરી બે તબક્કામાં કરવામાં આવે છે. પ્રથમ, કાચની સ્લાઇડ પર નાસોફેરિંજલ મ્યુકસનો સમીયર તૈયાર કરવામાં આવે છે. પરિણામી સ્મીયર્સ -20 ડિગ્રી સેલ્સિયસ તાપમાને ઘણા મહિનાઓ સુધી સંગ્રહિત કરી શકાય છે. બીજા તબક્કે, શ્વસન સિંસીટીયલ વાયરસ એન્ટિજેનને શોધવા માટે સ્મીયર્સ સ્ટેન કરવામાં આવે છે. આ હેતુ માટે, પરોક્ષ ઇમ્યુનોફ્લોરેસેન્સની પદ્ધતિનો ઉપયોગ થાય છે.

3.1.1 નાસોફેરિંજલ સ્ત્રાવની તૈયારીઓની તૈયારી

1. સ્પેશિયલ ફોર્સેપ્સમાંથી લાળને 1-2 મિલી પીબીએસથી ધોઈને સેન્ટ્રીફ્યુજ ટ્યુબમાં ટ્રાન્સફર કરવામાં આવે છે.

2. ટેબલટોપ સેન્ટ્રીફ્યુજમાં 1500 આરપીએમ પર 10 મિનિટ માટે સેન્ટ્રીફ્યુજ કરો.

3. સુપરનેટન્ટ ડ્રેઇન કરવામાં આવે છે.

4. જ્યાં સુધી સજાતીય સસ્પેન્શન પ્રાપ્ત ન થાય ત્યાં સુધી સેલ પેલેટને PBS ના 2-3 મિલીલીટરમાં કાળજીપૂર્વક ફરીથી સસ્પેન્ડ કરવામાં આવે છે. આ કરવા માટે, પહોળા ગરદનવાળા પાશ્ચર પીપેટનો ઉપયોગ કરો.

5. પરિણામી સસ્પેન્શનને ટેસ્ટ ટ્યુબમાં ટ્રાન્સફર કરવામાં આવે છે.

6. સસ્પેન્શનમાં બીજું 2-4 મિલી PBS ઉમેરો અને પાઇપિંગ દ્વારા મિક્સ કરો. લાળના મોટા ગંઠાવાનું દૂર થાય છે.

7. ટેબલટોપ સેન્ટ્રીફ્યુજમાં 1500 આરપીએમ પર 10 મિનિટ માટે સેન્ટ્રીફ્યુજ કરો.

8. સુપરનેટન્ટને કાઢી નાખવામાં આવે છે, પીબીએસના આવા જથ્થામાં કાંપ ફરી વળે છે કે પરિણામી સસ્પેન્શન ટ્યુબની દિવાલોથી સરળતાથી અલગ થઈ જાય છે.

9. પરિણામી સસ્પેન્શન ચિહ્નિત કાચની સ્લાઇડ પર લાગુ થાય છે.

10. કાચ હવામાં સૂકવવામાં આવે છે.

4°C પર 10 મિનિટ માટે એસીટોનમાં ફિક્સ કરો.

12. ફિક્સ કર્યા પછી, ગ્લાસ ફરીથી હવામાં સૂકવવામાં આવે છે.

13. પરિણામી તૈયારીઓ તરત જ ડાઘ થઈ જાય છે અથવા -20 °C તાપમાને સંગ્રહિત થાય છે.

3.1.2. સ્ટેનિંગ તકનીક

1. પીબીએસમાં વ્યાપારી RSV એન્ટિસેરમને છાપો અને ભલામણ કરેલ કાર્યકારી સાંદ્રતામાં પાતળો કરો.

2. પાશ્ચર પીપેટનો ઉપયોગ કરીને, તૈયાર કરેલી તૈયારીમાં એન્ટિસેરમનું એક ડ્રોપ લાગુ કરો.

3. દવાને ભેજવાળા ચેમ્બરમાં મૂકવામાં આવે છે.

4. દવાને 37 °C તાપમાને 30 મિનિટ માટે ઉકાળવામાં આવે છે.

5. વિશિષ્ટ જળાશયમાં વધારાની એન્ટિબોડીઝને દૂર કરવા માટે નમૂનાઓ કાળજીપૂર્વક પીબીએસ સાથે ધોવાઇ જાય છે.

6. PBS ની ત્રણ શિફ્ટમાં દરેક 10 મિનિટમાં સેમ્પલ ધોવામાં આવે છે.

7. નમૂનાઓને સૂકવી દો, ફિલ્ટર પેપર વડે વધારાનું પીબીએસ દૂર કરો અને હવા સૂકી કરો.

વાઈરોલોજીકલ સંશોધન પદ્ધતિઓ

વાયરસના જીવવિજ્ઞાન અને તેમની ઓળખના અભ્યાસ માટેની પદ્ધતિઓ. વાઈરોલોજીમાં, મોલેક્યુલર બાયોલોજી પદ્ધતિઓનો વ્યાપકપણે ઉપયોગ થાય છે, જેની મદદથી વાયરલ કણોની પરમાણુ રચના, કોષમાં તેમના પ્રવેશની પદ્ધતિઓ અને વાયરલ પ્રજનનની સુવિધાઓ, વાયરલ ન્યુક્લિક એસિડ અને પ્રોટીનની પ્રાથમિક રચના સ્થાપિત કરવી શક્ય હતી. વાયરલ ન્યુક્લિક એસિડ અને પ્રોટીન એમિનો એસિડના ઘટક તત્વોનો ક્રમ નક્કી કરવા માટે પદ્ધતિઓ વિકસાવવામાં આવી રહી છે. ન્યુક્લીક એસિડના કાર્યો અને તેઓ જે પ્રોટીનને ન્યુક્લિયોટાઇડ ક્રમ સાથે એન્કોડ કરે છે તેને જોડવાનું અને વાયરલ ચેપના પેથોજેનેસિસમાં મહત્વની ભૂમિકા ભજવતી અંતઃકોશિક પ્રક્રિયાઓના કારણો સ્થાપિત કરવાનું શક્ય બને છે.

ચેપગ્રસ્ત કોષ સંસ્કૃતિઓમાં, વાઈરસને સેલ મોર્ફોલોજીમાં ફેરફાર, સાયટોપેથિક અસરો, જે ચોક્કસ હોઈ શકે છે, સમાવેશનો દેખાવ, કોષમાં અને સંસ્કૃતિ પ્રવાહીમાં વાયરલ એન્ટિજેન્સ નક્કી કરીને શોધી શકાય છે; કલ્ચર ફ્લુઇડમાં વાયરલ પ્રોજેનીના જૈવિક ગુણધર્મોની સ્થાપના અને ટીશ્યુ કલ્ચર, ચિકન એમ્બ્રોયો અથવા સંવેદનશીલ પ્રાણીઓમાં ટાઇટ્રેટિંગ વાયરસ; ફ્લોરોસન્ટ માઇક્રોસ્કોપીનો ઉપયોગ કરીને સાયટોકેમિકલ પદ્ધતિ દ્વારા મોલેક્યુલર હાઇબ્રિડાઇઝેશન અથવા ન્યુક્લીક એસિડના સંચય દ્વારા કોષોમાં વ્યક્તિગત વાયરલ ન્યુક્લિક એસિડને ઓળખીને.

વાયરસને અલગ પાડવી એ શ્રમ-સઘન અને સમય માંગી લે તેવી પ્રક્રિયા છે. તે વસ્તીમાં ફરતા વાયરસના પ્રકાર અથવા પ્રકારને નિર્ધારિત કરવા માટે હાથ ધરવામાં આવે છે (ઉદાહરણ તરીકે, ઈન્ફલ્યુએન્ઝા વાયરસના સેરોવેરિયન્ટને ઓળખવા માટે, પોલિયો વાયરસની જંગલી અથવા રસીની તાણ, વગેરે); એવા કિસ્સાઓમાં જ્યાં તાત્કાલિક રોગચાળાના પગલાં હાથ ધરવા જરૂરી છે; જ્યારે વાયરસના નવા પ્રકારો અથવા પ્રકારો દેખાય છે; જો જરૂરી હોય તો, પ્રારંભિક નિદાનની પુષ્ટિ કરો; પર્યાવરણીય પદાર્થોમાં વાયરસના સંકેત માટે. વાયરસને અલગ કરતી વખતે, માનવ શરીરમાં તેમના સતત રહેવાની શક્યતા, તેમજ બે કે તેથી વધુ વાયરસના કારણે મિશ્રિત ચેપની ઘટનાને ધ્યાનમાં લેવામાં આવે છે. એક વિરિયનમાંથી મેળવેલા વાયરસની આનુવંશિક રીતે સજાતીય વસ્તીને વાયરલ ક્લોન કહેવામાં આવે છે, અને તેને મેળવવાની પ્રક્રિયાને ક્લોનિંગ કહેવામાં આવે છે.

વાયરસને અલગ કરવા માટે, સંવેદનશીલ પ્રયોગશાળા પ્રાણીઓ અને ચિકન એમ્બ્રોયોના ચેપનો ઉપયોગ થાય છે, પરંતુ મોટાભાગે ટીશ્યુ કલ્ચરનો ઉપયોગ થાય છે. વાયરસની હાજરી સામાન્ય રીતે ચોક્કસ કોષ અધોગતિ (સાયટોપેથિક અસર), સિમ્પ્લાસ્ટ્સ અને સિન્સિટિયાની રચના, અંતઃકોશિક સમાવેશની શોધ, તેમજ ઇમ્યુનોફ્લોરેસેન્સ, હેમાડસોર્પ્શન, હેમાગ્ગ્લુટિનેશન (હેમેગ્ગ્લુટિનેટિંગ વાયરસ માટે) વગેરેનો ઉપયોગ કરીને શોધાયેલ ચોક્કસ એન્ટિજેન દ્વારા નક્કી કરવામાં આવે છે. . આ ચિહ્નો વાયરસના 2-3 માર્ગો પછી જ શોધી શકાય છે.

ઈન્ફલ્યુએન્ઝા વાયરસ જેવા સંખ્યાબંધ વાયરસને અલગ કરવા માટે, ચિકન એમ્બ્રોયોનો ઉપયોગ કરવામાં આવે છે, અને કેટલાક કોક્સસેકી વાયરસ અને સંખ્યાબંધ આર્બોવાયરસને અલગ કરવા માટે, નવજાત ઉંદરોનો ઉપયોગ કરવામાં આવે છે. સીરોલોજીકલ પ્રતિક્રિયાઓ અને અન્ય પદ્ધતિઓનો ઉપયોગ કરીને અલગ વાયરસની ઓળખ હાથ ધરવામાં આવે છે.

વાયરસ સાથે કામ કરતી વખતે, તેમનું ટાઇટર નક્કી કરવામાં આવે છે. વાયરસનું ટાઇટ્રેશન સામાન્ય રીતે ટીશ્યુ કલ્ચરમાં હાથ ધરવામાં આવે છે, જે વાયરસ ધરાવતા પ્રવાહીના સૌથી વધુ મંદનને નિર્ધારિત કરે છે કે જેના પર પેશી અધોગતિ થાય છે, સમાવેશ થાય છે અને વાયરસ-વિશિષ્ટ એન્ટિજેન્સ રચાય છે. પ્લેક પદ્ધતિનો ઉપયોગ સંખ્યાબંધ વાયરસને ટાઇટ્રેટ કરવા માટે કરી શકાય છે. પ્લેક્સ, અથવા વાયરસની નકારાત્મક વસાહતો, એગર કોટિંગ હેઠળ સિંગલ-લેયર ટીશ્યુ કલ્ચરમાં વાયરસ દ્વારા નાશ પામેલા કોષોનું કેન્દ્ર છે. વસાહતની ગણતરી એ વાયરસની ચેપી પ્રવૃત્તિના માત્રાત્મક પૃથ્થકરણ માટે પરવાનગી આપે છે કે એક ચેપી વાયરસ કણ એક તકતી બનાવે છે. તકતીઓને ઇન્ટ્રાવિટલ રંગો, સામાન્ય રીતે તટસ્થ લાલ રંગથી રંગીન રંગથી શોધી કાઢવામાં આવે છે; તકતીઓ રંગને શોષી શકતી નથી અને તેથી તે ડાઘવાળા જીવંત કોષોની પૃષ્ઠભૂમિ સામે પ્રકાશ ફોલ્લીઓ તરીકે દેખાય છે. વાઇરસ ટાઇટરને 1 દીઠ પ્લેક બનાવતા એકમોની સંખ્યા તરીકે દર્શાવવામાં આવે છે મિલી.

વાયરસનું શુદ્ધિકરણ અને એકાગ્રતા સામાન્ય રીતે વિભેદક અલ્ટ્રાસેન્ટ્રીફ્યુગેશન દ્વારા પૂર્ણ થાય છે અને ત્યારબાદ એકાગ્રતા અથવા ઘનતા ઢાળ સેન્ટ્રીફ્યુગેશન દ્વારા કરવામાં આવે છે. વાયરસને શુદ્ધ કરવા માટે, રોગપ્રતિકારક પદ્ધતિઓ, આયન વિનિમય ક્રોમેટોગ્રાફી, ઇમ્યુનોસોર્બેન્ટ્સ વગેરેનો ઉપયોગ થાય છે.

વાયરલ ચેપના લેબોરેટરી નિદાનમાં ક્લિનિકલ સામગ્રીમાં પેથોજેન અથવા તેના ઘટકોની શોધનો સમાવેશ થાય છે; આ સામગ્રીમાંથી વાયરસને અલગ પાડવું; સેરોડાયગ્નોસિસ. દરેક વ્યક્તિગત કેસમાં લેબોરેટરી ડાયગ્નોસ્ટિક પદ્ધતિની પસંદગી રોગની પ્રકૃતિ, બીમારીનો સમયગાળો અને પ્રયોગશાળાની ક્ષમતાઓ પર આધારિત છે. વાઇરલ ઇન્ફેક્શનનું આધુનિક નિદાન એક્સપ્રેસ પદ્ધતિઓ પર આધારિત છે જે રોગ પછીના પ્રારંભિક તબક્કામાં ક્લિનિકલ સામગ્રી લીધા પછી કેટલાક કલાકો પછી જવાબ મેળવવાનું શક્ય બનાવે છે. આમાં ઇલેક્ટ્રોન અને ઇમ્યુન ઇલેક્ટ્રોન માઇક્રોસ્કોપી, તેમજ ઇમ્યુનોફ્લોરેસેન્સ, મોલેક્યુલર હાઇબ્રિડાઇઝેશનની પદ્ધતિનો સમાવેશ થાય છે. , IgM વર્ગના એન્ટિબોડીઝની શોધ, વગેરે.

નકારાત્મક સ્ટેઇન્ડ વાયરસની ઇલેક્ટ્રોન માઇક્રોસ્કોપી વાયરસને અલગ પાડવા અને તેમની સાંદ્રતા નક્કી કરવાનું શક્ય બનાવે છે. વાઇરલ ઇન્ફેક્શનના નિદાનમાં ઇલેક્ટ્રોન માઇક્રોસ્કોપીનો ઉપયોગ એવા કિસ્સાઓ પૂરતો મર્યાદિત છે જ્યાં ક્લિનિકલ સામગ્રીમાં વાયરલ કણોની સાંદ્રતા ઘણી વધારે હોય છે (1 માં 10% મિલીઅને ઉચ્ચ). પદ્ધતિનો ગેરલાભ એ સમાન વર્ગીકરણ જૂથના વાયરસને અલગ પાડવાની અસમર્થતા છે. રોગપ્રતિકારક ઇલેક્ટ્રોન માઇક્રોસ્કોપીના ઉપયોગ દ્વારા આ ઉણપ દૂર થાય છે. આ પદ્ધતિ વાયરલ કણોમાં ચોક્કસ સીરમ ઉમેરીને રોગપ્રતિકારક સંકુલની રચના પર આધારિત છે, જ્યારે એક સાથે વાયરલ કણોને કેન્દ્રિત કરીને, તેમને ઓળખવા માટે પરવાનગી આપે છે. પદ્ધતિનો ઉપયોગ એન્ટિબોડીઝ શોધવા માટે પણ થાય છે. એક્સપ્રેસ ડાયગ્નોસ્ટિક હેતુઓ માટે, પેશીના અર્ક, મળ, વેસિકલ્સમાંથી પ્રવાહી અને નાસોફેરિન્ક્સમાંથી સ્ત્રાવની ઇલેક્ટ્રોન માઇક્રોસ્કોપિક પરીક્ષા હાથ ધરવામાં આવે છે. ઈલેક્ટ્રોન માઈક્રોસ્કોપીનો વ્યાપકપણે વાઈરસના મોર્ફોજેનેસિસનો અભ્યાસ કરવા માટે ઉપયોગ થાય છે; તેની ક્ષમતાઓ લેબલવાળા એન્ટિબોડીઝના ઉપયોગથી વિસ્તૃત થાય છે.

વાયરસ-વિશિષ્ટ ન્યુક્લિક એસિડની શોધ પર આધારિત મોલેક્યુલર હાઇબ્રિડાઇઝેશન પદ્ધતિ, જનીનોની એક નકલો શોધવાનું શક્ય બનાવે છે અને તેની સંવેદનશીલતામાં કોઈ સમાન નથી. પ્રતિક્રિયા પૂરક ડીએનએ અથવા આરએનએ સેર (પ્રોબ્સ) ના વર્ણસંકરીકરણ અને ડબલ-સ્ટ્રેન્ડેડ સ્ટ્રક્ચર્સની રચના પર આધારિત છે. સૌથી સસ્તી તપાસ ક્લોન કરેલ રિકોમ્બિનન્ટ ડીએનએ છે. ચકાસણીને કિરણોત્સર્ગી પુરોગામી (સામાન્ય રીતે કિરણોત્સર્ગી ફોસ્ફરસ) સાથે લેબલ કરવામાં આવે છે. રંગમેટ્રિક પ્રતિક્રિયાઓનો ઉપયોગ આશાસ્પદ છે. મોલેક્યુલર હાઇબ્રિડાઇઝેશન માટે ઘણા વિકલ્પો છે: સ્પોટ હાઇબ્રિડાઇઝેશન, બ્લૉટ હાઇબ્રિડાઇઝેશન, સેન્ડવિચ હાઇબ્રિડાઇઝેશન, ઇન સિટુ હાઇબ્રિડાઇઝેશન વગેરે.

IgM વર્ગના એન્ટિબોડીઝ વર્ગ G એન્ટિબોડીઝ કરતાં વહેલા દેખાય છે (બીમારીના 3જી-5મા દિવસે) અને થોડા અઠવાડિયા પછી અદૃશ્ય થઈ જાય છે, તેથી તેમની તપાસ તાજેતરના ચેપને સૂચવે છે. એલજીએમ વર્ગના એન્ટિબોડીઝ ઇમ્યુનોફ્લોરેસેન્સ દ્વારા અથવા એન્ટિ-μ એન્ટિસેરા (એલજીએમની ભારે સાંકળો સામે સેરા) નો ઉપયોગ કરીને એન્ઝાઇમ ઇમ્યુનોસે દ્વારા શોધી કાઢવામાં આવે છે.

વાઈરોલોજીમાં સેરોલોજીકલ પદ્ધતિઓ શાસ્ત્રીય રોગપ્રતિકારક પ્રતિક્રિયાઓ પર આધારિત છે (ઈમ્યુનોલોજીકલ સંશોધન પદ્ધતિઓ જુઓ) : પૂરક ફિક્સેશન પ્રતિક્રિયાઓ, હેમાગ્ગ્લુટિનેશન નિષેધ, જૈવિક તટસ્થીકરણ, ઇમ્યુનોડિફ્યુઝન, પરોક્ષ હેમાગ્ગ્લુટિનેશન, રેડિયલ હેમોલિસિસ, ઇમ્યુનોફ્લોરેસેન્સ, એન્ઝાઇમ ઇમ્યુનોસે, રેડિયો ઇમ્યુનોસે. ઘણી પ્રતિક્રિયાઓ માટે માઇક્રોમેથોડ્સ વિકસાવવામાં આવી છે, અને તેમની તકનીકોમાં સતત સુધારો કરવામાં આવી રહ્યો છે. આ પદ્ધતિઓનો ઉપયોગ જાણીતા સેરાના સમૂહનો ઉપયોગ કરીને વાયરસને ઓળખવા માટે અને પ્રથમની તુલનામાં બીજા સીરમમાં એન્ટિબોડીઝમાં વધારો નક્કી કરવા માટે સેરોડાયગ્નોસિસ માટે કરવામાં આવે છે (પ્રથમ સીરમ રોગ પછીના પ્રથમ દિવસોમાં લેવામાં આવે છે, બીજી - 2 પછી) 3 અઠવાડિયા). ડાયગ્નોસ્ટિક મૂલ્ય બીજા સીરમમાં એન્ટિબોડીઝમાં ચાર ગણા વધારા કરતાં ઓછું નથી. જો IgM વર્ગના એન્ટિબોડીઝની શોધ તાજેતરના ચેપને સૂચવે છે, તો પછી IgC વર્ગના એન્ટિબોડીઝ ઘણા વર્ષો સુધી ચાલુ રહે છે, અને કેટલીકવાર જીવન માટે.

પ્રોટીનના પ્રારંભિક શુદ્ધિકરણ વિના જટિલ મિશ્રણમાં વાયરસના વ્યક્તિગત એન્ટિજેન્સ અને એન્ટિબોડીઝને ઓળખવા માટે, ઇમ્યુનોબ્લોટિંગનો ઉપયોગ થાય છે. એન્ઝાઇમ ઇમ્યુનોસે પદ્ધતિનો ઉપયોગ કરીને પ્રોટીનના અનુગામી ઇમ્યુનોઇન્ડિકેશન સાથે પોલિએક્રિલામાઇડ જેલ ઇલેક્ટ્રોફોરેસીસનો ઉપયોગ કરીને આ પદ્ધતિ પ્રોટીન અપૂર્ણાંકને જોડે છે. પ્રોટીનનું વિભાજન એન્ટિજેનની રાસાયણિક શુદ્ધતા માટેની જરૂરિયાતોને ઘટાડે છે અને વ્યક્તિગત એન્ટિજેન-એન્ટિબોડી જોડીને ઓળખવાનું શક્ય બનાવે છે. આ કાર્ય સુસંગત છે, ઉદાહરણ તરીકે, એચઆઇવી ચેપના સેરોડાયગ્નોસિસમાં, જ્યાં ખોટા-પોઝિટિવ એન્ઝાઇમ-લિંક્ડ ઇમ્યુનોસોર્બન્ટ એસે પ્રતિક્રિયાઓ સેલ્યુલર એન્ટિજેન્સમાં એન્ટિબોડીઝની હાજરીને કારણે થાય છે, જે વાયરલ પ્રોટીનના અપૂરતા શુદ્ધિકરણના પરિણામે હાજર હોય છે. દર્દીના સેરામાં આંતરિક અને બાહ્ય વાયરલ એન્ટિજેન્સમાં એન્ટિબોડીઝની ઓળખ રોગના તબક્કાને નિર્ધારિત કરવાનું શક્ય બનાવે છે, અને વસ્તીનું વિશ્લેષણ કરતી વખતે, વાયરલ પ્રોટીનની પરિવર્તનશીલતા. HIV ચેપ માટે ઇમ્યુનોબ્લોટિંગનો ઉપયોગ વ્યક્તિગત વાયરલ એન્ટિજેન્સ અને એન્ટિબોડીઝને ઓળખવા માટે પુષ્ટિ પરીક્ષણ તરીકે થાય છે. વસ્તીનું વિશ્લેષણ કરતી વખતે, પદ્ધતિનો ઉપયોગ વાયરલ પ્રોટીનની પરિવર્તનશીલતા નક્કી કરવા માટે થાય છે. પદ્ધતિનું મહાન મૂલ્ય રિકોમ્બિનન્ટ ડીએનએ ટેક્નોલોજીનો ઉપયોગ કરીને સંશ્લેષિત એન્ટિજેન્સનું વિશ્લેષણ કરવાની, તેમના કદ અને એન્ટિજેનિક નિર્ધારકોની હાજરીની શક્યતામાં રહેલું છે.

ગ્રંથસૂચિ:બુક્રિન્સ્કાયા એ.જી. વાઈરોલોજી, એમ., 1986; વાઇરોલોજી, પદ્ધતિઓ, ઇડી. બી. મેખી, ટ્રાન્સ. અંગ્રેજીમાંથી, એમ., 1988; માઇક્રોબાયોલોજીકલ અને વાઇરોલોજિકલ સંશોધન પદ્ધતિઓની હેન્ડબુક, ઇડી. મો. બિરગેરા, એમ., 1982.

1. નાના તબીબી જ્ઞાનકોશ. - એમ.: તબીબી જ્ઞાનકોશ. 1991-96 2. પ્રાથમિક સારવાર. - એમ.: મહાન રશિયન જ્ઞાનકોશ. 1994 3. તબીબી શરતોનો જ્ઞાનકોશીય શબ્દકોશ. - એમ.: સોવિયેત જ્ઞાનકોશ. - 1982-1984.

વાયરસમિયા
વાઈરોલોજી

અન્ય શબ્દકોશોમાં "વાયરોલોજિકલ સંશોધન પદ્ધતિઓ" શું છે તે જુઓ:

વાઈરોલોજીકલ અભ્યાસ- વાયરસને શોધવા, તેમની ઓળખ (ઓળખ) અને તેમના જૈવિક ગુણધર્મોનો અભ્યાસ કરવાનો ધ્યેય છે. મનુષ્યો, પ્રાણીઓ અને છોડમાંથી વાઈરસ (વાઈરસ જુઓ)ને અલગ કરવા માટે, અભ્યાસ હેઠળની સામગ્રીને વાયરસ માટે સંવેદનશીલ લોકોના શરીરમાં દાખલ કરવામાં આવે છે... ... ગ્રેટ સોવિયેત જ્ઞાનકોશ

વાઈરોલોજિકલ સ્ટડીઝ- વાઈરોલોજિકલ અભ્યાસ, સંશોધન પદ્ધતિઓનો સમૂહ જે વાયરલ રોગના ઈટીઓલોજીને ઓળખવાનું અને તેના કારક એજન્ટનો અભ્યાસ કરવાનું શક્ય બનાવે છે. વી. અને.ના મુખ્ય તબક્કાઓ. બીમાર અને મૃત પ્રાણીઓમાંથી વાયરસનું અલગીકરણ છે (સંગ્રહ, કેનિંગ... વેટરનરી જ્ઞાનકોશીય શબ્દકોશ

લેબોરેટરી સંશોધન- લેબોરેટરી સંશોધન. લેબોરેટરી સ્ટડીઝ જુઓ. વિશ્વસનીય સંશોધન પરિણામો મેળવવા માટેની સૌથી મહત્વની સ્થિતિ એ છે કે વિશ્લેષણના પદાર્થોની યોગ્ય પસંદગી, તેમની સમયસર પસંદગી અને સંશોધન સમસ્યાનું નિર્માણ. નમૂના લેવાના નિયમો... માછલીના રોગો: એક માર્ગદર્શિકા

તબીબી પ્રયોગશાળાઓ- આરોગ્ય સંભાળ સંસ્થાઓ અથવા સારવારના માળખાકીય એકમો અને વિવિધ તબીબી સંશોધન કરવા માટે બનાવાયેલ નિવારક અથવા સેનિટરી સંસ્થાઓ. આ જૂથમાં વૈજ્ઞાનિકનો સમાવેશ થતો નથી... ... તબીબી જ્ઞાનકોશ

રોગશાસ્ત્ર- I રોગશાસ્ત્ર (રોગચાળો + ગ્રીક લોગો સિદ્ધાંત) એ એક વિજ્ઞાન છે જે રોગચાળાની પ્રક્રિયાના દાખલાઓનો અભ્યાસ કરે છે અને ચેપી માનવ રોગો સામે લડવાનાં પગલાં વિકસાવે છે. ઐતિહાસિક રીતે, ઇકોલોજી એક વૈજ્ઞાનિક શિસ્ત તરીકે વિકસિત થઈ છે, જેનો અભ્યાસ કરવાનો હેતુ છે... ... તબીબી જ્ઞાનકોશ

વાઈરોલોજી- I વાઇરોલોજી (વાયરસ [ઓ] (વાયરસ) + ગ્રીક લોગો સિદ્ધાંત) તબીબી જૈવિક વિજ્ઞાન જે વાયરસનો અભ્યાસ કરે છે. તે 19મી સદીના અંતમાં ઉદભવ્યું હતું, જ્યારે રશિયન વૈજ્ઞાનિક ડી.આઈ. ઇવાનવ્સ્કી (1892) એ પ્રથમ વ્યક્તિ હતા જેમણે નાના સુક્ષ્મસજીવોનું અસ્તિત્વ સ્થાપિત કર્યું જેનું કારણ બને છે... ... તબીબી જ્ઞાનકોશ

ટિક-જન્મેલા એન્સેફાલીટીસ- (સમાનાર્થી: ટિક-બોર્ન એન્સેફાલોમેલિટિસ, વસંત-ઉનાળામાં એન્સેફાલીટીસ, વસંત-ઉનાળામાં મેનિન્ગોએન્સેફાલીટીસ, તાઈગા એન્સેફાલીટીસ, રશિયન ફાર ઈસ્ટર્ન એન્સેફાલીટીસ) એક ચેપી રોગ જે તાવ, નશો અને મુખ્ય નુકસાન દ્વારા વર્ગીકૃત થયેલ છે... ... તબીબી જ્ઞાનકોશ

વાઈરોલોજીકલ સંશોધન પદ્ધતિઓ રોગપ્રતિકારક પ્રક્રિયાઓ (એન્ટિબોડીઝ સાથે એન્ટિજેનની ક્રિયાપ્રતિક્રિયા), વાયરસના જૈવિક ગુણધર્મો (હેમેગ્ગ્લુટીનેશન, હેમોલિસીસ, એન્ઝાઈમેટિક પ્રવૃત્તિ) પર આધારિત છે, યજમાન કોષ સાથે વાયરસની ક્રિયાપ્રતિક્રિયાના લક્ષણો (સાયટોપેથિક અસરની લાક્ષણિકતા) , અંતઃકોશિક સમાવેશની રચના, વગેરે).

વાઇરલ ઇન્ફેક્શનના નિદાનમાં, વાઇરસની ખેતી, અલગતા અને ઓળખમાં તેમજ રસીની તૈયારીના ઉત્પાદનમાં, પેશી અને કોષ સંવર્ધન પદ્ધતિનો વ્યાપકપણે ઉપયોગ થાય છે. પ્રાથમિક, ગૌણ, સ્થિર સતત અને ડિપ્લોઇડ સેલ સંસ્કૃતિઓનો ઉપયોગ થાય છે. પ્રાથમિક સંસ્કૃતિઓ પ્રોટીઓલિટીક ઉત્સેચકો (ટ્રિપ્સિન, કોલેજનેઝ) સાથે પેશીઓને વિખેરીને મેળવવામાં આવે છે. કોષોનો સ્ત્રોત માનવ અને પ્રાણીઓના ગર્ભના પેશીઓ અને અંગો (સામાન્ય રીતે કિડની) હોઈ શકે છે. પોષક માધ્યમમાં કોષોનું સસ્પેન્શન કહેવાતા ગાદલા, બોટલ અથવા પેટ્રી ડીશમાં મૂકવામાં આવે છે, જ્યાં, જહાજની સપાટી સાથે જોડાયા પછી, કોષો ગુણાકાર કરવાનું શરૂ કરે છે. વાયરસના ચેપ માટે, સેલ મોનોલેયરનો ઉપયોગ સામાન્ય રીતે થાય છે. પોષક પ્રવાહી ડ્રેઇન કરવામાં આવે છે, વાયરલ સસ્પેન્શન ચોક્કસ મંદીમાં ઉમેરવામાં આવે છે, અને કોષો સાથે સંપર્ક કર્યા પછી, તાજા પોષક માધ્યમ, સામાન્ય રીતે સીરમ વિના, ઉમેરવામાં આવે છે.

મોટાભાગની પ્રાથમિક સંસ્કૃતિઓના કોષોને ઉપસંસ્કૃતિ કરી શકાય છે; આવી સંસ્કૃતિને ગૌણ સંસ્કૃતિ કહેવામાં આવે છે. કોષોના વધુ માર્ગ સાથે, ફાઇબ્રોબ્લાસ્ટ જેવા કોષોની વસ્તી રચાય છે, જે ઝડપી પ્રજનન માટે સક્ષમ છે, જેમાંથી મોટાભાગના રંગસૂત્રોના મૂળ સમૂહને જાળવી રાખે છે. આ કહેવાતા ડિપ્લોઇડ કોષો છે. કોષોને શ્રેણીબદ્ધ રીતે સંવર્ધન કરીને, સ્થિર સતત કોષ સંસ્કૃતિઓ પ્રાપ્ત થાય છે. પેસેજ દરમિયાન, રંગસૂત્રોના હેટરોપ્લોઇડ સમૂહ સાથે ઝડપથી વિભાજિત સજાતીય કોષો દેખાય છે. સ્થિર કોષ રેખાઓ સિંગલ-લેયર અથવા સસ્પેન્શન હોઈ શકે છે. સિંગલ-લેયર સંસ્કૃતિઓ કાચની સપાટી પર સતત સ્તરના સ્વરૂપમાં વધે છે, જ્યારે સસ્પેન્શન સંસ્કૃતિઓ મિશ્રણ ઉપકરણોનો ઉપયોગ કરીને વિવિધ જહાજોમાં સસ્પેન્શનના સ્વરૂપમાં વૃદ્ધિ પામે છે. 40 વિવિધ પ્રાણીઓની પ્રજાતિઓ (પ્રાઈમેટ, પક્ષીઓ, સરિસૃપ, ઉભયજીવી, માછલી, જંતુઓ સહિત) અને મનુષ્યોમાંથી 400 થી વધુ કોષ રેખાઓ પ્રાપ્ત થાય છે.

કૃત્રિમ પોષક માધ્યમોમાં વ્યક્તિગત અંગો અને પેશીઓ (અંગ સંસ્કૃતિઓ) ના ટુકડાઓ સંવર્ધન કરી શકાય છે. આ પ્રકારની સંસ્કૃતિઓ પેશીની રચનાને સાચવે છે, જે ખાસ કરીને વાયરસના અલગતા અને પેસેજ માટે મહત્વપૂર્ણ છે જે અવિભાજ્ય પેશી સંસ્કૃતિઓમાં પ્રજનન કરતા નથી (ઉદાહરણ તરીકે, કોરોનાવાયરસ).

20) virions ના મુખ્ય માળખાકીય ઘટક (સંપૂર્ણ વાયરલ કણો) એ ન્યુક્લિયોકેપ્સિડ છે, એટલે કે. પ્રોટીન કેસ (કેપ્સિડ) જેમાં વાયરલ જીનોમ (ડીએનએ અથવા આરએનએ) હોય છે. મોટાભાગના વાયરલ પરિવારોના ન્યુક્લિયોકેપ્સિડ લિપોપ્રોટીન પરબિડીયુંથી ઘેરાયેલા હોય છે. કેટલાક વાયરસ (ઓર્થો-, પેરામિક્સો-, રાબડો-, ફાયલો- અને રેટ્રોવાયરસ) ના પરબિડીયું અને ન્યુક્લિયોકેપ્સિડની વચ્ચે એક બિન-ગ્લાયકોસિલેટેડ મેટ્રિક્સ પ્રોટીન હોય છે જે વાઇરોન્સને વધારાની કઠોરતા આપે છે. મોટાભાગના પરિવારોના વાયરસમાં એક પરબિડીયું હોય છે, જે ચેપમાં મહત્વપૂર્ણ ભૂમિકા ભજવે છે. જ્યારે ન્યુક્લિયોકેપ્સિડ ઉભરીને કોષ પટલમાં પ્રવેશ કરે છે ત્યારે વિરિયન્સ તેમના બાહ્ય શેલને પ્રાપ્ત કરે છે. પરબિડીયું પ્રોટીન વાયરસ દ્વારા એન્કોડ કરવામાં આવે છે, અને લિપિડ્સ કોષ પટલમાંથી લેવામાં આવે છે. ગ્લાયકોપ્રોટીન સામાન્ય રીતે ડાઇમર્સ અને ટ્રીમરના સ્વરૂપમાં વીરિયન્સની સપાટી પર પેપ્લોમર્સ (પ્રોટ્રુઝન) બનાવે છે (ઓર્થો-, પેરામિક્સોવાયરસ, રેબડો-, ફાયલો-, કોરોના-, બુનિયા-, એરેના-, રેટ્રોવાયરસ). ગ્લાયકોસીલેટેડ ફ્યુઝન પ્રોટીન પેપ્લોમેરેસ સાથે સંકળાયેલા છે અને કોષમાં વાયરલ પ્રવેશમાં મુખ્ય ભૂમિકા ભજવે છે. વિરિયન કેપ્સિડ અને એન્વલપ્સ સ્વ-એસેમ્બલીની પ્રક્રિયા દ્વારા એક અથવા વધુ પ્રકારના પ્રોટીન સબ્યુનિટ્સની બહુવિધ નકલો દ્વારા રચાય છે. પ્રોટીન-પ્રોટીન સિસ્ટમમાં ક્રિયાપ્રતિક્રિયા, નબળા રાસાયણિક બંધનને કારણે, સપ્રમાણ કેપ્સિડના જોડાણ તરફ દોરી જાય છે. વાયરસના આકાર અને કદમાં વાયરસ વચ્ચેનો તફાવત માળખાકીય પ્રોટીન સબ્યુનિટ્સના આકાર, કદ અને સંખ્યા અને તેમની વચ્ચેની ક્રિયાપ્રતિક્રિયાની પ્રકૃતિ પર આધારિત છે. કેપ્સિડમાં ઘણા મોર્ફોલોજિકલ રીતે અલગ સબ્યુનિટ્સ (કેપ્સોમેરેસ) હોય છે, જે પ્રમાણમાં સરળ ભૌમિતિક સિદ્ધાંતો અનુસાર સખત રીતે વ્યાખ્યાયિત રીતે વાયરલ પોલિપેપ્ટાઈડ્સમાંથી એસેમ્બલ થાય છે. પ્રોટીન સબ્યુનિટ્સ, એકબીજા સાથે જોડાયેલા, બે પ્રકારની સપ્રમાણતાના કેપ્સિડ બનાવે છે: આઇસોમેટ્રિક અને હેલિકલ. એન્વેલપ્ડ વાઈરસના ન્યુક્લિયોકેપ્સિડની રચના બિન-પરબિડીયું વાયરસના ન્યુક્લિયોકેપ્સિડની રચના જેવી જ હોય છે. વાયરસ શેલની સપાટી પર, મોર્ફોલોજિકલ રીતે વ્યક્ત ગ્લાયકોપ્રોટીન સ્ટ્રક્ચર્સ - પેપ્લોમેરેસ - અલગ પડે છે. સુપરકેપ્સિડ શેલની રચનામાં લિપિડ્સ (20-35% સુધી) અને કાર્બોહાઇડ્રેટ્સ (7-8% સુધી) સેલ્યુલર મૂળનો સમાવેશ થાય છે. તે લિપિડ બાયોલેયરની બહાર અને અંદર સ્થિત સેલ્યુલર લિપિડ્સ અને વાયરસ-વિશિષ્ટ પ્રોટીનનું ડબલ લેયર ધરાવે છે. સુપરકેપ્સિડ શેલનો બાહ્ય સ્તર એક અથવા વધુ પ્રકારના પેપ્લોમેરેસ (પ્રોટ્રુઝન) દ્વારા દર્શાવવામાં આવે છે, જેમાં એક અથવા વધુ ગ્લાયકોપ્રોટીન પરમાણુઓનો સમાવેશ થાય છે. પરબિડીયુંવાળા વાયરસના ન્યુક્લિયોકેપ્સિડને ઘણીવાર કોર કહેવામાં આવે છે, અને ન્યુક્લિક એસિડ ધરાવતા વિરિયન્સના મધ્ય ભાગને ન્યુક્લિયોઇડ કહેવામાં આવે છે. કેપ્સોમેરેસ (પેપ્લોમર્સ) એક અથવા અનેક હોમોલોગસ અથવા હેટરોલોગસ પોલિપેપ્ટાઇડ સાંકળો (પ્રોટીન સબયુનિટ્સ) થી બનેલા માળખાકીય એકમોનો સમાવેશ કરે છે. વાયરસનું વર્ગીકરણ આઇસોમેટ્રિક કેપ્સિડ ગોળા નથી, પરંતુ નિયમિત પોલિહેડ્રા (આઇકોસાહેડ્રોન) છે. તેમના રેખીય પરિમાણો સપ્રમાણતાની અક્ષો સાથે સમાન છે. કાસ્પર અને ક્લગ (1962) અનુસાર, કેપ્સિડમાં કેપ્સોમેરિસ આઇકોસેડ્રલ સપ્રમાણતા અનુસાર ગોઠવાય છે. આવા કેપ્સિડમાં સમાન સબ્યુનિટ્સનો સમાવેશ થાય છે જે આઇકોસાહેડ્રોન બનાવે છે. તેમની પાસે સમદ્વિબાજુ ત્રિકોણના રૂપમાં 12 શિરોબિંદુઓ (ખૂણા), 30 ચહેરા અને 20 સપાટીઓ છે. આ નિયમ અનુસાર, પોલિઓવાયરસ અને ફુટ-એન્ડ-માઉથ ડિસીઝ વાયરસના કેપ્સિડ 60 પ્રોટીન માળખાકીય એકમો દ્વારા રચાય છે, જેમાંના દરેકમાં ચાર પોલિપેપ્ટાઇડ સાંકળો હોય છે. આઇકોસાહેડ્રોન ન્યૂનતમ વોલ્યુમ સાથે કડક કોમ્પેક્ટ સ્ટ્રક્ચરમાં પુનરાવર્તિત સબ્યુનિટ્સને પેક કરવાની સમસ્યાને શ્રેષ્ઠ રીતે હલ કરે છે. માળખાકીય સબ્યુનિટ્સની માત્ર અમુક રૂપરેખાઓ સપાટીઓ બનાવી શકે છે અને વાયરલ આઇકોસાહેડ્રોનના શિરોબિંદુઓ અને ચહેરાઓ બનાવી શકે છે. ઉદાહરણ તરીકે, એડેનોવાયરસના માળખાકીય સબ્યુનિટ્સ સપાટીઓ અને કિનારીઓ પર હેક્સાગોનલ કેપ્સોમર્સ (હેક્સોન્સ) અને ટોચ પર પેન્ટહેડ્રલ કેપ્સોમર્સ (પેપ્ટોન્સ) બનાવે છે. કેટલાક વાયરસમાં, બંને પ્રકારના કેપ્સોમેર સમાન પોલિપેપ્ટાઇડ્સ દ્વારા રચાય છે, અન્યમાં - વિવિધ પોલિપેપ્ટાઇડ્સ દ્વારા. વિવિધ વાયરસના માળખાકીય સબ્યુનિટ્સ એકબીજાથી અલગ હોવાથી, કેટલાક વાયરસ વધુ ષટ્કોણ દેખાય છે, અન્ય વધુ ગોળાકાર. તમામ જાણીતા ડીએનએ ધરાવતા કરોડરજ્જુના વાઇરસ, શીતળાના વાઇરસને બાદ કરતાં, તેમજ ઘણા આરએનએ ધરાવતા વાઇરસ (7 પરિવારો), ક્યુબિક પ્રકારની કેપ્સિડ સપ્રમાણતા ધરાવે છે. રીઓવાયરસ, અન્ય કરોડરજ્જુના વાયરસથી વિપરીત, ડબલ કેપ્સિડ (બાહ્ય અને આંતરિક) ધરાવે છે, દરેકમાં મોર્ફોલોજિકલ એકમો હોય છે. હેલિકલ પ્રકારની સપ્રમાણતાવાળા વાઈરસનો દેખાવ નળાકાર થ્રેડ જેવી રચના હોય છે; તેમના જીનોમિક આરએનએ હેલિક્સનો આકાર ધરાવે છે અને કેપ્સિડની અંદર સ્થિત છે. હેલિકલ સપ્રમાણતાના તમામ પ્રાણી વાયરસ લિપોપ્રોટીન પરબિડીયું દ્વારા ઘેરાયેલા છે. હેલિકલ ન્યુક્લિયોકેપ્સિડ લંબાઈ, વ્યાસ, હેલિક્સ પિચ અને હેલિક્સ ટર્ન દીઠ કેપ્સોમેર્સની સંખ્યા દ્વારા વર્ગીકૃત થયેલ છે. આમ, સેન્ડાઈ વાયરસ (પેરામિક્સોવાયરસ) માં, ન્યુક્લિયોકેપ્સિડ એ લગભગ 1 μm લાંબું, 20 nm વ્યાસ અને 5 nm પિચનું હેલિક્સ છે. કેપ્સિડમાં આશરે 2400 માળખાકીય એકમોનો સમાવેશ થાય છે, જેમાંથી દરેક 60 kDa ના પરમાણુ વજન સાથે પ્રોટીન છે. હેલિક્સના દરેક વળાંક માટે 11-13 સબ્યુનિટ્સ છે. હેલિકલ પ્રકારના ન્યુક્લિયોકેપ્સિડ સપ્રમાણતાવાળા વાયરસમાં, પ્રોટીન પરમાણુઓને હેલિક્સમાં ફોલ્ડ કરવાથી ન્યુક્લીક એસિડ અને પ્રોટીન સબ્યુનિટ્સ વચ્ચે મહત્તમ ક્રિયાપ્રતિક્રિયા સુનિશ્ચિત થાય છે. આઇકોસાહેડ્રલ વાયરસમાં, ન્યુક્લીક એસિડ વીરિયનની અંદર જોડાયેલું હોય છે અને કેપ્સિડની અંદર સ્થિત એક અથવા વધુ પોલિપેપ્ટાઇડ્સ સાથે ક્રિયાપ્રતિક્રિયા કરે છે.

એન્ટિરેસેપ્ટર્સ (રીસેપ્ટર્સ) વાયરલ- સપાટીના વિરિયન પ્રોટીન, ઉદાહરણ તરીકે, હેમાગ્ગ્લુટીનિન, જે અતિસંવેદનશીલ કોષના અનુરૂપ રીસેપ્ટર સાથે પૂરક રીતે જોડાય છે.

21) વાઈરોલોજીકલ અભ્યાસમાં રોગપ્રતિકારક પદ્ધતિઓ.

સેરોલોજિકલ પરીક્ષણો એન્ટિબોડીઝના વ્યક્તિગત વર્ગોને શોધવાની તેમની ક્ષમતામાં બદલાય છે. એગ્ગ્લુટિનેશન ટેસ્ટ, ઉદાહરણ તરીકે, IgG એન્ટિબોડીઝ સારી રીતે શોધી કાઢે છે, પરંતુ IgG એન્ટિબોડીઝને શોધવા માટે ઓછી સંવેદનશીલ હોય છે. પૂરક ફિક્સેશન અને હેમોલિસિસ પ્રતિક્રિયાઓ, જેને પૂરકની જરૂર હોય છે, તે બિન-પૂરક-ફિક્સિંગ એન્ટિબોડીઝ દ્વારા શોધી શકાતી નથી, જેમ કે IgA એન્ટિબોડીઝ અને IgE એન્ટિબોડીઝ. વાયરસ તટસ્થતાની પ્રતિક્રિયામાં પેથોજેનિસિટી સાથે સંકળાયેલ વીરિયન સપાટીના એન્ટિજેનિક નિર્ધારકો સામે નિર્દેશિત એન્ટિબોડીઝનો જ સમાવેશ થાય છે. સંવેદનશીલતા I. m. અને. એન્ટિજેન્સ અને એન્ટિબોડીઝનો અભ્યાસ કરવા માટેની અન્ય તમામ પદ્ધતિઓને વટાવી જાય છે; ખાસ કરીને, રેડિયો ઇમ્યુનોસેઝ અને એન્ઝાઇમ ઇમ્યુનોસેઝ નેનોગ્રામ અને પિકોગ્રામમાં પણ માપવામાં આવેલા જથ્થામાં પ્રોટીનની હાજરી શોધવાનું શક્ય બનાવે છે. I. m. અને ની મદદ સાથે. જૂથ નક્કી કરો અને લોહીની સલામતી તપાસો (હેપેટાઇટિસ બી અને એચઆઇવી ચેપ). પેશીઓ અને અવયવોનું પ્રત્યારોપણ કરતી વખતે, I. m. અને. અસંગતતાને દબાવવા માટે તમને પેશીઓની સુસંગતતા અને પરીક્ષણ પદ્ધતિઓ નક્કી કરવાની મંજૂરી આપે છે. ફોરેન્સિક દવામાં, કેસ્ટેલાની પ્રતિક્રિયાનો ઉપયોગ પ્રોટીનની પ્રજાતિની વિશિષ્ટતા અને રક્ત જૂથ નક્કી કરવા માટે એગ્લુટિનેશન પ્રતિક્રિયા નક્કી કરવા માટે થાય છે.

ચેપી રોગોના પ્રયોગશાળા નિદાનમાં રોગપ્રતિકારક પદ્ધતિઓનો વ્યાપકપણે ઉપયોગ થાય છે. રોગના પ્રથમ દિવસોમાં લીધેલા નમૂનાની તુલનામાં સ્વસ્થ રક્ત સીરમમાં પેથોજેન માટે એન્ટિબોડીઝના વધારાના આધારે રોગની ઇટીઓલોજી પણ સ્થાપિત થાય છે. આઇ એમ અને પર આધારિત. ઈન્ફલ્યુએન્ઝા જેવા સામૂહિક ચેપ સામે વસ્તીની રોગપ્રતિકારક શક્તિનો અભ્યાસ કરો અને નિવારક રસીકરણની અસરકારકતાનું મૂલ્યાંકન પણ કરો.

તેમની મિકેનિઝમ પર આધાર રાખીને અને I.m. અને ના પરિણામોને ધ્યાનમાં લેતા. એગ્ગ્લુટિનેશનની ઘટનાના આધારે પ્રતિક્રિયાઓમાં વિભાજિત કરી શકાય છે; વરસાદની ઘટના પર આધારિત પ્રતિક્રિયાઓ; પૂરક સંડોવતા પ્રતિક્રિયાઓ; તટસ્થતા પ્રતિક્રિયા; રાસાયણિક અને ભૌતિક પદ્ધતિઓનો ઉપયોગ કરીને પ્રતિક્રિયાઓ.

એગ્લુટિનેશનની ઘટના પર આધારિત પ્રતિક્રિયાઓ. એગ્ગ્લુટિનેશન એ કોષો અથવા વ્યક્તિગત કણોનું ગ્લુઇંગ છે જે આ એન્ટિજેનમાં રોગપ્રતિકારક સીરમની મદદથી એન્ટિજેન વહન કરે છે.

યોગ્ય એન્ટિબેક્ટેરિયલ સીરમનો ઉપયોગ કરીને બેક્ટેરિયલ એગ્લુટિનેશન પ્રતિક્રિયા એ સૌથી સરળ સેરોલોજીકલ પ્રતિક્રિયાઓમાંની એક છે. ટેસ્ટ બ્લડ સીરમના વિવિધ ડિલ્યુશનમાં બેક્ટેરિયાનું સસ્પેન્શન ઉમેરવામાં આવે છે અને t°37° પર ચોક્કસ સંપર્ક સમય પછી તે લોહીના સીરમ એગ્ગ્લુટિનેશનના સૌથી વધુ મંદન પર રેકોર્ડ કરવામાં આવે છે. બેક્ટેરિયલ એગ્લુટિનેશન પ્રતિક્રિયાનો ઉપયોગ ઘણા ચેપી રોગોના નિદાન માટે થાય છે: બ્રુસેલોસિસ, તુલેરેમિયા, ટાઇફોઇડ અને પેરાટાઇફોઇડ તાવ, બેસિલરી ડિસેન્ટરી, ટાઇફસ.

નિષ્ક્રિય અથવા પરોક્ષ હેમાગ્ગ્લુટિનેશન પ્રતિક્રિયા (RPHA, RNHA). તે લાલ રક્ત કોશિકાઓ અથવા તટસ્થ કૃત્રિમ સામગ્રી (ઉદાહરણ તરીકે, લેટેક્સ કણો) નો ઉપયોગ કરે છે, જેની સપાટી પર એન્ટિજેન્સ (બેક્ટેરિયલ, વાઇરલ, પેશી) અથવા એન્ટિબોડીઝ શોષાય છે. જ્યારે યોગ્ય સેરા અથવા એન્ટિજેન્સ ઉમેરવામાં આવે ત્યારે તેમનું એકત્રીકરણ થાય છે.

નિષ્ક્રિય હિમેગ્ગ્લુટિનેશન પ્રતિક્રિયાનો ઉપયોગ બેક્ટેરિયા (ટાઇફોઇડ અને પેરાટાઇફોઇડ તાવ, મરડો, બ્રુસેલોસિસ, પ્લેગ, કોલેરા, વગેરે), પ્રોટોઝોઆ (મેલેરિયા) અને વાયરસ (ઈન્ફલ્યુએન્ઝા, એડેનોવાયરલ ચેપ, વાયરલ હેપેટાઇટિસ બી, ઓરી, ટિક-) દ્વારા થતા રોગોના નિદાન માટે થાય છે. જન્મજાત એન્સેફાલીટીસ, ક્રિમિઅન હેમોરહેજિક તાવ, વગેરે), તેમજ પેનિસિલિન અને ઇન્સ્યુલિન જેવી દવાઓ અને હોર્મોન્સ પ્રત્યે દર્દીની અતિસંવેદનશીલતાને ઓળખવા માટે ચોક્કસ હોર્મોન્સ નક્કી કરવા.

હિમેગ્ગ્લુટિનેશન ઇન્હિબિશન રિએક્શન (HAI) એ રોગપ્રતિકારક સીરમ વાયરસ દ્વારા એરિથ્રોસાઇટ્સના હિમેગ્ગ્લુટિનેશનને અટકાવવાની (નિરોધક) ઘટના પર આધારિત છે અને તેનો ઉપયોગ એન્ટિવાયરલ એન્ટિબોડીઝને શોધવા અને ટાઇટ્રેટ કરવા માટે થાય છે. તે ઈન્ફલ્યુએન્ઝા, ઓરી, રૂબેલા, ગાલપચોળિયાં, ટિક-જન્મેલા એન્સેફાલીટીસ અને અન્ય વાયરલ ચેપના સેરોડાયગ્નોસિસ માટેની મુખ્ય પદ્ધતિ તરીકે સેવા આપે છે, જેનાં કારક એજન્ટો હેમેગ્ગ્લુટિનેટિંગ ગુણધર્મો ધરાવે છે. ઉદાહરણ તરીકે, ટિક-જન્મેલા એન્સેફાલીટીસના સેરોડાયગ્નોસિસ માટે, આલ્કલાઇન બોરેટ બફર સોલ્યુશનમાં દર્દીના સીરમના બે ગણા મંદનને પેનલના કુવાઓમાં રેડવામાં આવે છે. પછી ટિક-બોર્ન એન્સેફાલીટીસ એન્ટિજેનની ચોક્કસ રકમ, સામાન્ય રીતે 8 એયુ (એગ્લુટિનેટિંગ એકમો) ઉમેરવામાં આવે છે અને t°4° પર 18 કલાકના સંપર્કમાં આવ્યા પછી, એસિડિક ફોસ્ફેટ-બફરવાળા દ્રાવણમાં તૈયાર હંસના લાલ રક્તકણોનું સસ્પેન્શન ઉમેરવામાં આવે છે. . જો દર્દીના લોહીના સીરમમાં ટિક-જન્મેલા એન્સેફાલીટીસ વાયરસ માટે એન્ટિબોડીઝ હોય, તો એન્ટિજેન તટસ્થ થઈ જાય છે અને લાલ રક્ત કોશિકાઓનું સંચય થતું નથી.

વરસાદની ઘટના પર આધારિત પ્રતિક્રિયાઓ. દ્રાવ્ય એન્ટિજેન્સ સાથે એન્ટિબોડીઝની ક્રિયાપ્રતિક્રિયાના પરિણામે વરસાદ થાય છે. અવક્ષેપની પ્રતિક્રિયાનું સૌથી સરળ ઉદાહરણ એ એન્ટિબોડી પર એન્ટિજેનના સ્તરીકરણની સીમા પર અપારદર્શક વરસાદી પટ્ટીની ટેસ્ટ ટ્યુબમાં રચના છે. અર્ધ-પ્રવાહી અગર અથવા એગ્રોઝ જેલ્સમાં વિવિધ પ્રકારની વરસાદની પ્રતિક્રિયાઓ વ્યાપકપણે ઉપયોગમાં લેવાય છે (ઓચટરલોહન અનુસાર ડબલ ઇમ્યુનોડિફ્યુઝન પદ્ધતિ, રેડિયલ ઇમ્યુનોડિફ્યુઝન પદ્ધતિ, ઇમ્યુનોઇલેટ્રોફોરેસિસ), જે ગુણાત્મક અને જથ્થાત્મક બંને છે. તેમના શ્રેષ્ઠ ગુણોત્તરના ઝોનમાં જેલમાં એન્ટિજેન્સ અને એન્ટિબોડીઝના મુક્ત પ્રસારના પરિણામે, ચોક્કસ સંકુલ રચાય છે - અવક્ષેપ બેન્ડ્સ, જે દૃષ્ટિની અથવા સ્ટેનિંગ દ્વારા શોધી કાઢવામાં આવે છે. પદ્ધતિની વિશિષ્ટ વિશેષતા એ છે કે પ્રત્યેક એન્ટિજેન-એન્ટિબોડી જોડી વ્યક્તિગત વરસાદી પટ્ટી બનાવે છે, અને પ્રતિક્રિયા અભ્યાસ હેઠળની સિસ્ટમમાં અન્ય એન્ટિજેન્સ અને એન્ટિબોડીઝની હાજરી પર આધારિત નથી.

તાજા ગિનિ પિગ બ્લડ સીરમનો ઉપયોગ કરતા પૂરકને સંડોવતા પ્રતિક્રિયાઓ, પૂરક સબકમ્પોનન્ટ Clq અને પછી અન્ય પૂરક ઘટકોની રોગપ્રતિકારક સંકુલ સાથે જોડવાની ક્ષમતા પર આધારિત છે.

કોમ્પ્લિમેન્ટ ફિક્સેશન રિએક્શન (CFR) એન્ટિજેન-એન્ટિબોડી કોમ્પ્લેક્સ દ્વારા પૂરક ફિક્સેશનની ડિગ્રી અનુસાર એન્ટિજેન્સ અથવા એન્ટિબોડીઝના ટાઇટ્રેશનને મંજૂરી આપે છે. આ પ્રતિક્રિયામાં બે તબક્કાઓનો સમાવેશ થાય છે: પરીક્ષણ રક્ત સીરમ (પરીક્ષણ સિસ્ટમ) સાથે એન્ટિજેનની ક્રિયાપ્રતિક્રિયા અને ઘેટાંના લાલ રક્ત કોશિકાઓ (સૂચક સિસ્ટમ) સાથે હેમોલિટીક સીરમની ક્રિયાપ્રતિક્રિયા. અભ્યાસ હેઠળની સિસ્ટમમાં સકારાત્મક પ્રતિક્રિયા સાથે, પૂરક ફિક્સેશન થાય છે, અને પછી એન્ટિબોડીઝ દ્વારા સંવેદનશીલ એરિથ્રોસાઇટ્સના ઉમેરા સાથે, હેમોલિસિસ જોવા મળતું નથી. પ્રતિક્રિયાનો ઉપયોગ સિફિલિસ (વાસરમેન પ્રતિક્રિયા), વાયરલ અને બેક્ટેરિયલ ચેપના સેરોડાયગ્નોસિસ માટે થાય છે.

તટસ્થતા પ્રતિક્રિયા એ એન્ટિબોડીઝની મેક્રોમોલેક્યુલર અથવા દ્રાવ્ય એન્ટિજેન્સના ચોક્કસ કાર્યોને બેઅસર કરવાની ક્ષમતા પર આધારિત છે, ઉદાહરણ તરીકે, એન્ઝાઇમ પ્રવૃત્તિ, બેક્ટેરિયલ ઝેર અને વાયરલ રોગકારકતા. ઝેરી તટસ્થતાની પ્રતિક્રિયાનું મૂલ્યાંકન જૈવિક અસર દ્વારા કરી શકાય છે, ઉદાહરણ તરીકે, એન્ટિ-ટેટેનસ અને એન્ટિ-બોટ્યુલિનમ સીરમ ટાઇટ્રેટેડ છે. પ્રાણીઓને આપવામાં આવતા ઝેર અને એન્ટિસેરમનું મિશ્રણ તેમના મૃત્યુનું કારણ નથી. વાઈરોલોજીમાં તટસ્થતા પ્રતિક્રિયાના વિવિધ સંસ્કરણોનો ઉપયોગ થાય છે. યોગ્ય એન્ટિસેરમ સાથે વાયરસનું મિશ્રણ કરીને અને આ મિશ્રણને પ્રાણીઓમાં અથવા કોષ સંસ્કૃતિઓમાં દાખલ કરવાથી, વાયરસની રોગકારકતા તટસ્થ થઈ જાય છે અને પ્રાણીઓ બીમાર થતા નથી, અને સંસ્કૃતિના કોષોનો નાશ થતો નથી.

રાસાયણિક અને ભૌતિક લેબલોનો ઉપયોગ કરીને પ્રતિક્રિયાઓ. ઇમ્યુનોફ્લોરેસેન્સમાં ફ્લોરોક્રોમ-લેબલવાળા એન્ટિબોડીઝનો ઉપયોગ સામેલ છે, વધુ સ્પષ્ટ રીતે, IgG એન્ટિબોડીઝના ઇમ્યુનોગ્લોબ્યુલિન અપૂર્ણાંક. ફ્લોરોક્રોમ સાથે લેબલવાળી એન્ટિબોડી એન્ટિજેન સાથે એન્ટિજેન-એન્ટિબોડી સંકુલ બનાવે છે, જે ફ્લોરોક્રોમને ઉત્તેજિત કરતા યુવી કિરણોમાં માઇક્રોસ્કોપ હેઠળ અવલોકન માટે સુલભ બને છે. ડાયરેક્ટ ઇમ્યુનોફ્લોરેસેન્સ પ્રતિક્રિયાનો ઉપયોગ સેલ્યુલર એન્ટિજેન્સનો અભ્યાસ કરવા, ચેપગ્રસ્ત કોષોમાં વાયરસ શોધવા અને સ્મીયરમાં બેક્ટેરિયા અને રિકેટ્સિયાને શોધવા માટે થાય છે.

પરોક્ષ ઇમ્યુનોફ્લોરેસેન્સની પદ્ધતિ વધુ વ્યાપકપણે ઉપયોગમાં લેવાય છે. IgG એન્ટિબોડીઝ સામે લ્યુમિનેસેન્ટ ઇમ્યુન સીરમનો ઉપયોગ કરીને એન્ટિજેન-એન્ટિબોડી સંકુલની શોધ પર આધારિત છે અને તેનો ઉપયોગ માત્ર એન્ટિજેન્સ જ નહીં, પણ એન્ટિબોડીઝ ટાઇટ્રેટ પણ શોધવા માટે થાય છે.

ઇમ્યુનોએન્ઝાઇમ, અથવા એન્ઝાઇમ-ઇમ્યુનોલોજિકલ, પદ્ધતિઓ ઉત્સેચકો સાથે સંયોજિત એન્ટિબોડીઝના ઉપયોગ પર આધારિત છે, મુખ્યત્વે horseradish peroxidase અથવા alkaline phosphatase. ઇમ્યુનોફ્લોરોસેન્સની જેમ, એન્ઝાઇમ ઇમ્યુનોસે પદ્ધતિનો ઉપયોગ કોશિકાઓમાં એન્ટિજેન્સ શોધવા અથવા એન્ટિજેન ધરાવતા કોષો પર એન્ટિબોડીઝ ટાઇટ્રેટ કરવા માટે થાય છે.

રેડિયોઈમ્યુનોલોજિકલ પદ્ધતિ એન્ટિજેન્સ અથવા એન્ટિબોડીઝના રેડિયોઆઈસોટોપ લેબલના ઉપયોગ પર આધારિત છે. એન્ટિજેન્સ અને એન્ટિબોડીઝ નક્કી કરવા માટે તે સૌથી સંવેદનશીલ પદ્ધતિ છે; તેનો ઉપયોગ હોર્મોન્સ, દવાઓ અને એન્ટિબાયોટિક્સ નક્કી કરવા, બેક્ટેરિયલ, વાયરલ, રિકેટ્સિયલ, પ્રોટોઝોલ રોગોનું નિદાન કરવા, રક્ત પ્રોટીન અને પેશી એન્ટિજેન્સનો અભ્યાસ કરવા માટે થાય છે.

ઇમ્યુનોબ્લોટિંગનો ઉપયોગ વ્યક્તિગત એન્ટિજેન્સના એન્ટિબોડીઝને શોધવા અથવા જાણીતા સેરામાંથી એન્ટિજેન્સને "ઓળખવા" માટે થાય છે. પદ્ધતિમાં 3 તબક્કાઓનો સમાવેશ થાય છે: જૈવિક મેક્રોમોલેક્યુલ્સ (ઉદાહરણ તરીકે, વાયરસ) ને પોલિએક્રાયલામાઇડ જેલ ઇલેક્ટ્રોફોરેસીસનો ઉપયોગ કરીને વ્યક્તિગત પ્રોટીનમાં અલગ કરવું; સક્રિય કાગળ અથવા નાઈટ્રોસેલ્યુલોઝ (ઈલેક્ટ્રોબ્લોટિંગ) પર પોલિએક્રાયલામાઈડ જેલ પ્લેટ મૂકીને જેલમાંથી અલગ થયેલા પ્રોટીનને નક્કર આધાર (બ્લોટ) પર સ્થાનાંતરિત કરવું; પ્રત્યક્ષ અથવા પરોક્ષ એન્ઝાઇમ ઇમ્યુનોસેનો ઉપયોગ કરીને સબસ્ટ્રેટ પર ઇચ્છિત પ્રોટીનની શોધ. એચ.આય.વી સંક્રમણ માટે ઇમ્યુનોબ્લોટિંગનો ઉપયોગ નિદાન પદ્ધતિ તરીકે થાય છે. વાયરસના બાહ્ય શેલના પ્રોટીનમાંથી એકમાં એન્ટિબોડીઝની તપાસ નિદાન મૂલ્ય ધરાવે છે.

22) વાયરસની સમપ્રમાણતાના પ્રકારો (ઘન, સર્પાકાર, મિશ્ર). વાયરલ જીનોમના પેકેજીંગ દરમિયાન પ્રોટીન અને ન્યુક્લીક એસિડની ક્રિયાપ્રતિક્રિયા.

ન્યુક્લીક એસિડ સાથે કેપ્સિડની ક્રિયાપ્રતિક્રિયાના આધારે, વાયરલ કણોને વિવિધ પ્રકારની સમપ્રમાણતામાં વિભાજિત કરી શકાય છે:

1). ક્યુબિક પ્રકારની સમપ્રમાણતા.

ક્યુબિક કેપ્સિડ એ લગભગ 20 ત્રિકોણાકાર સપાટીઓ અને 12 શિરોબિંદુઓ સાથે આઇકોસાઇડર છે. તેઓ ગોળાકાર રચના જેવું માળખું બનાવે છે, પરંતુ હકીકતમાં તે બહુહેડ્રોન છે. કેટલાક કિસ્સાઓમાં, સ્પાઇન્સ તરીકે ઓળખાતી ખાસ લિપોપ્રોટીન રચનાઓ આવા આઇકોસહેડ્રલ પોલિહેડ્રાના શિરોબિંદુઓ સાથે જોડાયેલી હોય છે. આ સ્પાઇક્સની ભૂમિકા સંભવતઃ તેમના પ્રત્યે સંવેદનશીલ યજમાન કોષોના અનુરૂપ વિસ્તારો સાથે વિરિયન અથવા વાયરલ કણોની ક્રિયાપ્રતિક્રિયામાં ઘટાડો થાય છે. ક્યુબિક સપ્રમાણતા સાથે, વાયરલ ન્યુક્લિક એસિડ ચુસ્ત રીતે પેક કરવામાં આવે છે (એક બોલમાં વીંટાળવામાં આવે છે), અને પ્રોટીન પરમાણુઓ તેની આસપાસ હોય છે, જે પોલિહેડ્રોન (આઇકોસાહેડ્રોન) બનાવે છે. આઇકોસાહેડ્રોન એ વીસ ત્રિકોણાકાર ચહેરાઓ ધરાવતું બહુહેડ્રોન છે, જે ઘન સમપ્રમાણતા ધરાવે છે અને લગભગ ગોળાકાર આકાર ધરાવે છે. આઇકોસહેડ્રલ વાયરસમાં હર્પીસ સિમ્પ્લેક્સ વાયરસ, રીઓવાયરસ વગેરેનો સમાવેશ થાય છે.

2). સર્પાકાર પ્રકારની સમપ્રમાણતા. હેલિકલ કેપ્સિડ રચનામાં થોડા સરળ છે. તે. કેપ્સોમર્સ જે કેપ્સિડ બનાવે છે તે હેલિકલ NAને આવરી લે છે અને આ વાયરસનું એકદમ સ્થિર પ્રોટીન શેલ પણ બનાવે છે. અને જ્યારે ઉચ્ચ-રિઝોલ્યુશન ઇલેક્ટ્રોન માઇક્રોસ્કોપ અને યોગ્ય તૈયારી પદ્ધતિઓનો ઉપયોગ કરવામાં આવે છે, ત્યારે વ્યક્તિ વાયરસ પર હેલિકલ સ્ટ્રક્ચર્સ જોઈ શકે છે. કેપ્સિડની હેલિકલ સપ્રમાણતા સાથે, વાયરલ ન્યુક્લીક એસિડ સર્પાકાર (અથવા હેલિકલ) આકૃતિ બનાવે છે, અંદર હોલો હોય છે, અને પ્રોટીન સબ્યુનિટ્સ (કેપ્સોમર્સ) પણ તેની આસપાસ સર્પાકાર (ટ્યુબ્યુલર કેપ્સિડ) માં ગોઠવાયેલા હોય છે. હેલિકલ કેપ્સિડ સમપ્રમાણતાવાળા વાયરસનું ઉદાહરણ તમાકુ મોઝેક વાયરસ છે, જે સળિયાના આકારનો અને 15 એનએમના વ્યાસ સાથે 300 એનએમ લાંબો છે. વાયરલ કણમાં લગભગ 6,000 ન્યુક્લિયોટાઇડ્સનું એક RNA અણુ હોય છે. કેપ્સિડમાં સર્પાકારમાં ગોઠવાયેલા 2000 સમાન પ્રોટીન સબ્યુનિટ્સનો સમાવેશ થાય છે.

3). મિશ્ર અથવા જટિલ પ્રકારની સમપ્રમાણતા. એક નિયમ તરીકે, આ પ્રકારની સમપ્રમાણતા મુખ્યત્વે બેક્ટેરિયલ વાયરસ વચ્ચે મળી આવે છે. અને ઉત્તમ ઉદાહરણો તે ફેજીસ, ઇ. કોલી અથવા સમશીતોષ્ણ ફેજીસ છે. આ જટિલ રચનાઓ છે જેનું માથું આંતરિક ન્યુક્લિક સામગ્રી, વિવિધ પ્રકારના જોડાણો, પૂંછડીની પ્રક્રિયા અને વિવિધ ડિગ્રીની જટિલતાવાળા ઉપકરણો ધરાવે છે. અને આવા કણોના દરેક ઘટક ચોક્કસ કાર્યથી સંપન્ન છે જે કોષ સાથે વાયરસની ક્રિયાપ્રતિક્રિયા દરમિયાન અનુભવાય છે. બીજા શબ્દોમાં કહીએ તો, જટિલ પ્રકારની સપ્રમાણતા એ ઘન સમપ્રમાણતાનું સંયોજન છે, માથું એક આઇકોસાઇડર પોલિહેડ્રોન છે અને સળિયાના આકારની રચનાઓ પૂંછડીની પ્રક્રિયાઓ છે. જોકે બેક્ટેરિયલ વાઈરસમાં તદ્દન સરળ રીતે સંગઠિત વિરિયન્સ પણ છે જે આદિમ ન્યુક્લિયોકેપ્સિડ, ગોળાકાર અથવા ઘન આકારના છે. બેક્ટેરિયલ વાયરસ વનસ્પતિ વાયરસ અને પ્રાણી વાયરસની તુલનામાં સૌથી જટિલ છે.

24) કોષ સાથે ફેજની ક્રિયાપ્રતિક્રિયા. વાઇરલન્ટ અને સમશીતોષ્ણ ફેજીસ.

શોષણ.

આ ક્રિયાપ્રતિક્રિયા કોષની સપાટી પર વાયરલ કણોના જોડાણથી શરૂ થાય છે. કોષની સપાટી પર યોગ્ય રીસેપ્ટર્સ અને વાયરલ પાર્ટિકલની સપાટી પર એન્ટી રીસેપ્ટર્સની હાજરીમાં પ્રક્રિયા શક્ય બને છે.

વાયરસ જરૂરી પદાર્થોના પરિવહન માટે રચાયેલ સેલ રીસેપ્ટર્સનો ઉપયોગ કરે છે: પોષક કણો, હોર્મોન્સ, વૃદ્ધિના પરિબળો વગેરે.

રીસેપ્ટર્સ: પ્રોટીન, પ્રોટીન અને લિપિડ્સના કાર્બોહાઇડ્રેટ ઘટક, લિપિડ્સ. ચોક્કસ રીસેપ્ટર્સ વાયરલ કણનું આગળનું ભાવિ નક્કી કરે છે (પરિવહન, સાયટોપ્લાઝમ અથવા ન્યુક્લિયસના વિસ્તારોમાં વિતરણ). વાયરસ બિન-વિશિષ્ટ રીસેપ્ટર્સ સાથે પણ જોડાઈ શકે છે અને કોષમાં પણ પ્રવેશ કરી શકે છે. જો કે, આ પ્રક્રિયા ચેપના વિકાસનું કારણ નથી.

પ્રથમ, એન્ટિરેસેપ્ટર અને રીસેપ્ટર વચ્ચે એક જ બોન્ડ રચાય છે. આવા જોડાણ નાજુક છે અને તોડી શકાય છે. ઉલટાવી શકાય તેવું શોષણની રચના માટે, મલ્ટિવેલેન્ટ જોડાણ જરૂરી છે. મેમ્બ્રેનમાં રીસેપ્ટર પરમાણુઓની મુક્ત હિલચાલને કારણે સ્થિર બંધન થાય છે. જ્યારે વાયરસ કોષ સાથે ક્રિયાપ્રતિક્રિયા કરે છે, ત્યારે લિપિડ પ્રવાહીતામાં વધારો અને વાયરસ અને કોષ વચ્ચેની ક્રિયાપ્રતિક્રિયાના ક્ષેત્રમાં રીસેપ્ટર ક્ષેત્રોની રચના જોવા મળે છે. કેટલાક વાયરસ માટે રીસેપ્ટર્સ માત્ર યજમાન કોષોના મર્યાદિત સમૂહમાં હાજર હોઈ શકે છે. આ વાયરસ પ્રત્યે શરીરની સંવેદનશીલતા નક્કી કરે છે. આમ, વાયરલ ડીએનએ અને આરએનએ યજમાન કોશિકાઓની વિશાળ શ્રેણીને સંક્રમિત કરવાની ક્ષમતા ધરાવે છે.

એન્ટિરિસેપ્ટર્સ અનન્ય વાયરલ ઓર્ગેનેલ્સમાં મળી શકે છે: ટી-બેક્ટેરિયોફેજેસમાં એપેન્ડેજ સ્ટ્રક્ચર્સ, એડેનોવાયરસમાં ફાઇબર, વાયરલ મેમ્બ્રેનની સપાટી પર સ્પાઇક્સ, કોરોનાવાયરસમાં કોરોના.

ઘૂંસપેંઠ.

2 મિકેનિઝમ્સ - રીસેપ્ટર એન્ડોસાયટોસિસ અને મેમ્બ્રેન ફ્યુઝન.

રીસેપ્ટર એન્ડોસાયટોસિસ:

કોષમાં પોષક તત્ત્વો અને નિયમનકારી પદાર્થોના પ્રવેશ માટેની સામાન્ય પદ્ધતિ. વિશિષ્ટ વિસ્તારોમાં થાય છે - જ્યાં ક્લેથ્રિનથી ઢંકાયેલ ખાસ ખાડાઓ હોય છે; ખાડાના તળિયે ચોક્કસ રીસેપ્ટર્સ હોય છે. ખાડાઓ ઝડપી આક્રમણ અને ક્લેથ્રિન-કોટેડ વેક્યૂલ્સની રચના પૂરી પાડે છે (શોષણની ક્ષણથી 10 મિનિટથી વધુ સમય પસાર થતો નથી; એક મિનિટમાં 2000 સુધી વેક્યૂલ્સ બની શકે છે). શૂન્યાવકાશ મોટા સાયટોપ્લાઝમિક શૂન્યાવકાશ સાથે ભળી જાય છે, જે રીસેપ્ટોરોસોમ બનાવે છે (હવે ક્લેથ્રિન ધરાવતું નથી), જે બદલામાં લાઇસોસોમ સાથે ભળી જાય છે.

વાયરલ અને સેલ્યુલર મેમ્બ્રેનનું ફ્યુઝન:

પરબિડીયું વાયરસમાં, કોષ પટલના લિપિડ્સ સાથે વાયરલ પ્રોટીનની બિંદુ ક્રિયાપ્રતિક્રિયાને કારણે ફ્યુઝન થાય છે, પરિણામે વાયરલ લિપોપ્રોટીન પરબિડીયું કોષ પટલ સાથે એકીકૃત થાય છે. બિન-પરબિડીયું વાયરસમાં, સપાટી પ્રોટીનમાંથી એક કોષ પટલના લિપિડ સાથે પણ ક્રિયાપ્રતિક્રિયા કરે છે અને આંતરિક ઘટક પટલમાંથી પસાર થાય છે (પેરામિક્સોવાયરસમાં તે એફ પ્રોટીન છે, ઓર્થોમીક્સોવાયરસમાં તે HA2 હેમેગ્ગ્લુટિનેટિંગ સબ્યુનિટ છે). સપાટી પ્રોટીનની રચના pH દ્વારા પ્રભાવિત છે.

પટ્ટી.

આ પ્રક્રિયા દરમિયાન, ચેપી પ્રવૃત્તિ અદૃશ્ય થઈ જાય છે, ન્યુક્લિસિસ પ્રત્યે સંવેદનશીલતા ઘણીવાર દેખાય છે, અને એન્ટિબોડીઝ સામે પ્રતિકાર ઉભો થાય છે. કપડાં ઉતારવાનું અંતિમ ઉત્પાદન આંતરિક વાયરલ પ્રોટીન સાથે બંધાયેલ ન્યુક્લિક એસિડ છે. કપડાં ઉતારવાનો તબક્કો પણ ચેપની શક્યતાને મર્યાદિત કરે છે (વાયરસ દરેક કોષમાં કપડાં ઉતારવામાં સક્ષમ નથી). કપડાં ઉતારવાનું કોષના વિશિષ્ટ વિસ્તારોમાં થાય છે: લિસોસોમ્સ, ગોલ્ગી ઉપકરણ, પેરીન્યુક્લિયર સ્પેસ.

અસંખ્ય પ્રતિક્રિયાઓના પરિણામે કપડાં ઉતારવાનું થાય છે. ઉદાહરણ તરીકે, પિકોર્નાવાયરસમાં, 156 થી 12S સુધીના કદ સાથે મધ્યવર્તી સબવાયરલ કણોની રચના સાથે કપડાં ઉતારવાનું થાય છે. સાયટોપ્લાઝમ અને પરમાણુ છિદ્રોમાં એડેનોવાયરસમાં અને ઓછામાં ઓછા 3 તબક્કાઓ ધરાવે છે:

virions કરતાં વધુ ઘનતા સાથે સબવાયરલ કણોની રચના;

3 વાયરલ પ્રોટીનનો અભાવ ધરાવતા કોરોની રચના;

ડીએનએ-પ્રોટીન સંકુલની રચના જેમાં ડીએનએ ટર્મિનલ પ્રોટીન સાથે સહસંબંધિત રીતે જોડાયેલ છે.

વાઇરલન્ટ અને સમશીતોષ્ણ ફેજીસની લાક્ષણિકતાઓ.

જ્યારે બેક્ટેરિયમ ફેજથી સંક્રમિત થાય છે, ત્યારે કહેવાતા લિટીક ચેપ થાય છે, એટલે કે, એક ચેપ જે યજમાન કોષના લિસિસ સાથે સમાપ્ત થાય છે, પરંતુ આ માત્ર કહેવાતા વાયરલ ફેજીસની લાક્ષણિકતા છે, જેની ક્રિયાપ્રતિક્રિયા સાથે કોષ કોષ મૃત્યુ તરફ દોરી જાય છે અને ફેજ પ્રોજેનીની રચના કરે છે.

આ કિસ્સામાં, કોષ સાથેના ફેજની ક્રિયાપ્રતિક્રિયાઓ અનુસાર નીચેના તબક્કાઓને અલગ પાડવામાં આવે છે: કોષ સંસ્કૃતિ સાથે ફેજનું મિશ્રણ (ચેપનો ગુણાકાર 10 કોષો દીઠ 1 ફેજ છે), અને એકાગ્રતા ફેજીસને મંજૂરી આપવા માટે પૂરતી ઊંચી હોવી જોઈએ. કોષોનો સંપર્ક કરવા માટે. ફરીથી ચેપ ટાળવા માટે - ચેપ પછી મહત્તમ 5 મિનિટ સુધી, જ્યારે ફેજીસ શોષાય છે - ફેજ સાથેના કોષોનું આ મિશ્રણ પાતળું થાય છે. ત્યાં એક સુપ્ત સમયગાળો છે જે દરમિયાન ફેજીસની સંખ્યામાં વધારો થતો નથી, તે પછી પ્રકાશનનો ખૂબ જ ટૂંકો સમયગાળો, જ્યારે ફેજ કણોની સંખ્યામાં તીવ્ર વધારો થાય છે, જ્યારે કોષને લીસ કરવામાં આવે છે અને ફેજ પ્રોજેની રીલીઝ થાય છે, અને પછી ફેજીસની સંખ્યા સમાન સ્તરે રહે છે, કારણ કે ફરીથી ચેપ થતો નથી. આ વળાંકના આધારે, અમે આ તબક્કાઓને અલગ પાડી શકીએ છીએ: "વૃદ્ધિ" નો વનસ્પતિ સમયગાળો (સુપ્ત સમયગાળો), પ્રકાશનનો સમયગાળો, અને 1 ચેપગ્રસ્ત કોષ દીઠ ફેજ ઉપજની ગણતરી કરો. સુપ્ત સમયગાળા દરમિયાન, બેક્ટેરિયામાં ફેજ કણો જેવું કંઈપણ શોધવું શક્ય નથી અને ગુપ્ત અવધિમાં આવા કોષોમાંથી ચેપી સિદ્ધાંતને અલગ પાડવું શક્ય નથી. માત્ર પરિપક્વ ફેજ કણો જ બેક્ટેરિયાના ચેપનું કારણ બને છે. આમ, વાયરલ ફેજીસ હંમેશા બેક્ટેરિયાના મૃત્યુનું કારણ બને છે અને ચેપ ઉત્પન્ન કરે છે, જે નવા વાયરલ કણોના ઉત્પાદનમાં પ્રગટ થાય છે જે નીચેના અને તેમના પ્રત્યે સંવેદનશીલ અન્ય કોષોને સંક્રમિત કરવામાં સક્ષમ છે.

વિષાણુઓથી વિપરીત, સમશીતોષ્ણ ફેજીસનો ચેપ બેક્ટેરિયલ કોશિકાઓના લિસિસ તરફ દોરી જતો નથી, પરંતુ બેક્ટેરિયલ કોષ સાથે ફેજના સહઅસ્તિત્વની વિશેષ સ્થિતિની રચના થાય છે. આ સહઅસ્તિત્વ એ હકીકતમાં વ્યક્ત કરવામાં આવે છે કે ફેજની ચોક્કસ શરૂઆત બેક્ટેરિયલ કોષમાં તેના માટે કોઈપણ પ્રતિકૂળ પરિસ્થિતિઓ વિના હાજર છે અને પેઢી દર પેઢી સચવાય છે. આવા સહઅસ્તિત્વના ચોક્કસ તબક્કામાં, ફેજ કોષમાં સક્રિય થાય છે અને lytic વિકાસ ચક્રની સ્થિતિમાં પ્રવેશે છે, જેના કારણે કોષનું વિસર્જન થાય છે અને ફેજ પ્રોજેનીનું પ્રકાશન થાય છે. આવા ફેજીસને લિસોજેનિક અથવા સમશીતોષ્ણ ફેજીસ કહેવામાં આવે છે, અને ફેજ સાથે મધ્યમ અસ્તિત્વની સ્થિતિ લિસોજેની છે, અને બેક્ટેરિયા કે જેમાં આવા છુપાયેલા ફેજ હોય છે તે લિસોજેનિક બેક્ટેરિયા છે. લાઇસોજેનિક બેક્ટેરિયા શબ્દ એ હકીકત પરથી આવ્યો છે કે સંસ્કૃતિઓ એકવાર મળી આવી હતી જેમાં એક ફેજ સ્વયંભૂ દેખાય છે, અને આ બેક્ટેરિયોફેજને સંસ્કૃતિના દૂષણ તરીકે ગણવામાં આવે છે, એટલે કે, બેક્ટેરિયા વાયરસ સંસ્કૃતિમાં પ્રવેશ કરે છે, અને આવી સંસ્કૃતિઓને લિસોજેનિક કહેવામાં આવે છે. એટલે કે, તેઓ લિસિસ પેદા કરે છે.